目前有 210 +种不同种类的支原体分布于人类、动物、昆虫和植物中,其中 20 +种在细胞培养中被发现为污染物。支原体在实验室中的传播来源多种多样,主要来源包括实验室人员、胎牛血清(FBS)或新生牛血清(NBS)、以及由猪来源的胰蛋白酶溶液。此外,来自其他实验室或商业供应商的细胞培养物、培养基、污染的试剂;非无菌供应品、培养基和溶液;实验室人员;培养箱;液氮;空气颗粒和气溶胶;抗*素的过度使用;细胞培养器皿的不正确密封;以及其他的支原体细胞培养物等都可能成为支原体的传播途径。
支原体去除之后对细胞转染有无影响?广州支原体去除试剂货期
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方法 |
灵敏度 |
优势 |
劣势 |
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培养法 |
☆☆☆ |
ü 便捷 ü 便宜 ü 金标准 |
ü 费劳力 ü 耗时长 ü 需要特定的培养基 ü 特定支原体种类需要特定的培养基 |
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DNA染色 (DAPI or Hoescht) |
☆ |
ü 迅速 ü 便捷 ü 便宜 |
ü 可能难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属 ü 可能假阳性可能性 |
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间接染色 |
☆☆☆ |
ü 迅速 ü 便宜 ü 易检测 |
ü 费时 ü 需要细胞系指示 |
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ELISA |
☆☆ |
ü 迅速 ü 客观,易判读结果 ü 可以鉴别支原体种属 |
ü 受抗体限制 ü 价格高 |
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免疫染色 |
☆☆ |
ü 迅速 ü 可检测支原体种属 ü 价格略高 |
ü 可检测的支原体种属有限 |
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放射自显影 |
☆☆ |
ü 迅速 |
ü 难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属 ü 费劳力 |
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生物发光 |
☆☆ |
ü 迅速 ü 便捷 ü 便宜 |
ü 难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属 |
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PCR |
☆☆☆ |
ü 便宜 ü 迅速 ü 具有特异性 |
ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性 ü 需要提取DNA |
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Real-Time PCR |
☆☆☆ |
ü 便捷 ü 迅速 ü 具有特异性 ü 结果可靠 ü 高通量 |
ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性 ü 需要提取DNA |
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LAMP |
☆☆ |
ü 便捷 ü 无需DNA提取 ü *需10min左右的实验操作时间 ü 具有特异性 ü 高通量 |
ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性 深圳支原体检测方法等温扩增巢式PCR法和一步法恒温支原体检测试剂盒到底哪个比较好呢? |
什么样的客户需要定期检测支原体污染?广州支原体去除试剂货期
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