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北京免疫沉淀磁珠价格

ChIP（染色质免疫沉淀）实验是一种用于研究蛋白质与DNA相互作用的技术。以下是ChIP实验的实验设计概述： ...

免疫沉淀基本参数

品牌
世途科生物
产品名称
免疫沉淀磁珠Protein A/G
有效期
12个月

免疫沉淀企业商机

ChIP（染色质免疫沉淀）实验是一种用于研究蛋白质与DNA相互作用的技术。以下是ChIP实验的实验设计概述：

1. 目标蛋白的选择：确定您想要研究的目标蛋白，例如特定的转录因子或组蛋白修饰。

2. 样本的准备：根据研究的需要选择合适的细胞或组织样本。

3. 抗体的选择：选择具有高特异性和亲和力的抗体，这对于实验的成功至关重要。

4. 交联：使用甲醛等交联剂将蛋白质与DNA在体内共价结合，形成稳定的蛋白质-DNA复合物。

5. 细胞裂解：裂解细胞以释放染色质，同时保持蛋白质-DNA复合物的完整性。

6. 染色质的剪切：通过超声或酶消化将染色质剪切成适当大小的片段，通常在200-1000 bp之间。

7. 免疫沉淀：使用特定抗体与目标蛋白结合，然后利用蛋白A/G磁珠沉淀复合物。

8. 洗涤和洗脱：洗涤沉淀物以去除未特异性结合的蛋白质和DNA，然后洗脱目标蛋白-DNA复合物。

9. 逆转交联：使用蛋白酶K处理样品以逆转交联，释放DNA。

10. DNA的纯化和分析：纯化DNA并使用qPCR、芯片或测序技术（如ChIP-seq）进行分析。

免疫沉淀技术的优缺点？北京免疫沉淀磁珠价格

免疫沉淀技术RIP（RNA Immunoprecipitation，RNA免疫沉淀）的实验方法基于以下几个关键步骤：

1. 细胞裂解：首先，细胞或组织样本被裂解，以释放细胞内的蛋白质和RNA复合物。

2.抗体特异性结合：裂解后的样本中加入针对特定RNA结合蛋白的抗体。这些抗体能够特异性地识别并结合到目标蛋白。

3. 免疫复合物形成：抗体与目标蛋白结合后，形成抗体-蛋白质-RNA复合物。

4. 亲和介质捕获：使用蛋白A或蛋白G结合的珠子（如琼脂糖或磁性珠子）来捕获这些抗体-蛋白质-RNA复合物。蛋白A或蛋白G能够与抗体的Fc部分结合，从而拉下与之结合的复合物。

5. 洗涤：捕获的复合物被洗涤以去除未特异性结合的蛋白质和RNA。

6. RNA分离和分析：从珠子上洗脱或消化复合物，分离出RNA，并进行进一步的分析，如qPCR、Northern blot或高通量测序（RNA-Seq）。

上海Co IP免疫沉淀磁珠原理免疫沉淀技术ChIP的原理是什么？

ChIP（染色质免疫沉淀）实验是一种用于研究蛋白质与DNA相互作用的技术。以下是ChIP实验的实验方法概述：

1. 交联：将细胞与交联剂（如1%甲醛）孵育，通常在室温下进行10-15分钟。

2. 终止交联：添加甘氨酸以终止交联反应，孵育5分钟。

3. 收集细胞：通过离心收集细胞，并用PBS洗涤以去除交联剂。

4. 细胞裂解：使用裂解缓冲液裂解细胞，释放染色质。

5. 染色质剪切：使用超声波或酶消化将染色质剪切成适当大小的片段。

6. 免疫沉淀：将剪切后的染色质与特异性抗体孵育，然后添加蛋白A/G磁珠。

7. 洗涤：用低盐、高盐和LiCl洗涤液洗涤磁珠，去除非特异性结合物。

8. 洗脱：用洗脱缓冲液洗脱DNA。

9. 逆转交联：用蛋白酶K处理，然后在65°C下加热过夜以逆转交联。

10. DNA纯化：使用商业试剂盒或标准酚/氯仿方法纯化DNA。

11. 分析：使用qPCR分析富集的DNA，或进行测序以确定蛋白质结合位点。

ChIP实验的基本步骤包括：

1. 交联（Crosslinking）：细胞被甲醛等交联剂处理，使得蛋白质和DNA之间的相互作用被固定，形成稳定的蛋白质-DNA复合物。

2. 细胞裂解：裂解细胞，释放染色质，同时保持蛋白质-DNA复合物的完整性。

3. 超声或酶解：通过超声或酶解将染色质切割成较小的片段，以便于后续步骤中的免疫沉淀。

4. 免疫沉淀（Immunoprecipitation）：加入针对特定组蛋白修饰或转录因子的抗体，这些抗体会特异性地结合到目标蛋白质上。

5. 捕获复合物：使用蛋白A或蛋白G结合的珠子捕获抗体-蛋白质-DNA复合物。

6. 洗涤：洗涤珠子以去除未特异性结合的蛋白质和DNA片段。

7. 逆转录交联：将捕获的复合物从珠子上洗脱，并进行逆转录交联，使固定的蛋白质-DNA复合物分离。

8. DNA纯化：纯化从免疫沉淀中得到的DNA片段。

9. 分析：通过qPCR、芯片分析（ChIP-chip）或高通量测序（ChIP-seq）等方法分析沉淀的DNA片段，以确定特定蛋白质在基因组上的结合位点。

免疫沉淀技术ChIP是什么？

染色质免疫共沉淀（Chromatinimmunoprecipitation，ChIP）技术是目前公认的研究此相互作用的选择，是真核生物基因表达机制研究中不可或缺的技术之一。

它的基本原理是在活细胞状态下，固定蛋白质-DNA（染色质）复合物，并将其切断为一定长度范围内的染色质小片段，然后通过免疫学方法（抗体亲和）沉淀此复合体，特异性地富集目的蛋白结合的 DNA，通过对目的片段的纯化与后期检测，从而获得蛋白质与 DNA 相互作用的信息。

这项技术通过蛋白质与DNA互作来分析目标基因活性以及已知蛋白质的靶基因，被广泛应用于体内转录调控因子与靶基因启动子上特异核苷酸序列结合方面的研究。该技术常与DNA芯片和分子克隆技术相结合。

免疫沉淀技术RIP的优缺点是什么？杭州anti Flag免疫沉淀外包公司

免疫沉淀技术Co-IP的原理是什么？北京免疫沉淀磁珠价格

Co-IP（Co-Immunoprecipitation，共免疫沉淀）的实验方法通常包括以下步骤：

1. 细胞培养与裂解：细胞在适宜的培养条件下生长到适当的密度。

蛋白质分离：裂解后的细胞混合物通过离心去除未破碎的细胞碎片和未裂解的细胞。收集上清液

2. 抗体的添加：将特异性抗体（针对目标蛋白质的抗体）加入到裂解物中。

3. 免疫复合物的形成：抗体与目标蛋白结合后，形成免疫复合物。

4. 亲和介质的使用：向混合物中添加蛋白A或蛋白G结合的珠子（如琼脂糖或磁性珠子）。

5. 免疫复合物的捕获：将混合物与珠子孵育一段时间后，使用磁铁或离心的方法将珠子收集起来，同时捕获了与之结合的免疫复合物。

6. 洗涤：洗涤珠子以去除未特异性结合的蛋白质和其他分子。

7. 洗脱：使用适当的缓冲液将免疫复合物从珠子上洗脱下来，常用的缓冲液包括SDS样品缓冲液，用于后续的电泳分析。

8. 蛋白质分析：洗脱的蛋白质可以通过SDS-PAGE凝胶电泳、Western blot、质谱分析等方法进行进一步分析。

9. 实验对照：实验中应包括阳性对照和阴性对照，以确保实验结果的可靠性。

10. 数据分析：对实验结果进行分析，确认目标蛋白是否成功沉淀，并鉴定任何可能的相互作用蛋白。

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