1st Strand cDNA Synthesis Kit(RNase H-)的逆转录过程是将RNA模板转换成cDNA的过程。这个过程通常包括以下几个步骤:模板RNA的准备:确保RNA模板的质量和纯度,可能需要使用DNase I来去除RNA样品中的DNA污染。逆转录反应体系的配制:根据试剂盒的说明,将RNA模板、引物(如Oligo(dT)、随机六聚体或基因特异性引物)、dNTPs、逆转录酶和缓冲液等组分混合在一起。逆转录酶的启用:如果需要,可能要将反应体系预热到一定温度以达到逆转录酶。逆转录反应:在适宜的条件下,逆转录酶会根据RNA模板合成一条互补的DNA链。这个过程通常在一定的温度范围内进行,以保证酶的活性和反应的效率。反应的终止:逆转录反应完成后,通常通过加热到较高温度来终止反应,以防止cDNA的进一步合成。产物的纯化:合成的cDNA可能需要通过某些方法(如柱层析或沉淀)进行纯化,以去除未反应的dNTPs、RNA模板和酶等。cDNA的检测和应用:合成的cDNA可以用于后续的PCR、qPCR、克隆、测序等实验。跨膜蛋白的表达与制备需要采用合适的表达载体、宿主细胞、培养条件和纯化工艺等方法,优化表达和纯化过程。Recombinant Human CD74/DHLAG (His Tag)

AdvanceFastPCRMasterMix(2×)与高保真DNA聚合酶之间的具体联系主要体现在以下几个方面:1.**成分**:高保真DNA聚合酶是AdvanceFastPCRMasterMix(2×)中的关键成分之一。这种酶负责在PCR过程中合成新的DNA链,其保真度决定了扩增过程的准确性。2.**保真度**:AdvanceFastPCRMasterMix(2×)中的HieffCanace™AdvanceFastHigh-FidelityDNAPolymerase具有高保真度,这意味着在复制DNA时,它能够更准确地维持原始模板DNA的序列,减少错误或突变的引入。3.**酶的活性**:该产品中的高保真DNA聚合酶具有5'→3'DNA聚合酶活性和3'→5'核酸外切酶活性,这些活性有助于提高PCR扩增的特异性和效率。4.**扩增速度**:高保真DNA聚合酶在AdvanceFastPCRMasterMix(2×)中提供了快速的扩增速度,如5秒/kb,这有助于减少PCR扩增过程中的非特异性扩增。5.**适用性**:高保真DNA聚合酶使得AdvanceFastPCRMasterMix(2×)能够适用于不同GC含量的基因扩增,包括高GC和低GC区域,提高了PCR的适用性和成功率。

磁珠法质粒小量抽提试剂盒是一种利用磁性纳米分离技术和细菌细胞的SDS碱裂解法从菌体中提取高质量质粒DNA的实验工具。以下是一些关于磁珠法质粒小量抽提试剂盒的关键信息:1.**操作简便性**:-操作快速简单,可以在60分钟内完成96个不同样品的提取,实现质粒提取的高通量化和自动化。2.**高纯度和高产量**:-抽提得到的质粒纯度高,OD260/OD280比值一般为1.8~1.9之间,OD260/OD230比值大于2.0,可以直接用于转化、DNA测序、PCR和酶切等后续实验。3.**试剂盒组件**:-包含BufferMP1、BufferMP2、BufferMP3、PureMagBeads、BufferMPB、TEBuffer(pH8.0)、RNaseA等组分。4.**应用范围**:-适用于从大肠杆菌中抽提小量质粒,所得质粒可直接用于细胞转染、DNA测序、PCR等实验。5.**效率和纯度**:-与同类产品相比,提取效率更高,获得质粒的纯度更高;与柱式法相比,可减少离心次数,获得完整性更好的质粒。6.**注意事项**:-例如,SgMagBeads需要充分洗涤和干燥,以保证无乙醇残留,并且在吸取上清时避免吸入SgMagBeads。7.**保存条件**:-室温保存,有效期一年。磁珠长期不使用时,可以4℃保存以延长保存时间。
pA-Tn5转座酶是一种经过改造的高活性Tn5转座酶,与ProteinA融合,形成一种新型融合酶,应用于CUT&Tag技术中,用于研究蛋白质与基因组DNA的相互作用。这种融合酶具备以下特点:1.**高活性**:pA-Tn5转座酶是超高活性的突变形式,体外转座效率比野生型高1000倍。2.**ProteinA融合**:pA-Tn5转座酶的N端结构域为ProteinA的一部分,可以与免疫球蛋白的Fc区相互作用,特别是与大多数哺乳动物的IgG结合。3.**Tn5转座酶活性**:C端结构域为Tn5转座酶,能够特异性识别转座子两端反向重复的ME序列(MosaicEnd),并在形成转座复合体后随机插入靶DNA中。4.**应用广**:适用于CUT&Tag技术、高通量测序建库、ATAC-seq等,特别适用于早期胚胎发育、干细胞、以及表观遗传学等研究领域。5.**操作简便**:pA-Tn5转座酶的使用简化了实验步骤,可以在一步反应中实现DNA片段化和接头连接,从细胞到二代测序文库的转化过程需9小时。6.**低细胞投入量**:CUT&Tag技术允许从低至60个细胞的样本中获得结果,甚至可以应用于单细胞水平的研究。7.**高质量结果**:pA-Tn5转座酶的使用可以保证DNA片段化,同时获得的蛋白纯度高、核酸残留低。CB1受体包含多个跨膜α-螺旋结构域,这些结构域使得受体能够嵌入细胞膜中。 它具有七个跨膜区域。

PCR预混合溶液是一种为聚合酶链反应(PCR)实验预先配制好的混合试剂,它包含进行PCR所需的大部分或全部成分,除了特定的DNA模板、引物和可能的水之外。这种预混合溶液的设计旨在简化实验步骤,减少实验过程中的误差,提高实验的重复性和效率。通常,PCR预混合溶液包含以下成分:-**DNA聚合酶**:负责在PCR过程中合成新的DNA链。-**dNTPs**(脱氧核苷三磷酸):是DNA合成的原料,包括dATP、dCTP、dGTP和dTTP。-**缓冲体系**:提供适宜的pH和离子环境,保证DNA聚合酶的活性。-**Mg2+**:作为DNA聚合酶的辅助因子,影响酶的活性和PCR的特异性。-**稳定剂**:延长预混合溶液的有效期和稳定性。-**染料**(可选):如溴酚蓝或类似物质,用于在电泳时观察DNA条带。PCR预混合溶液的使用可以减少实验者在每次实验时手动添加各种成分的需要,从而节省时间并降低污染的风险。此外,一些预混合溶液还可能包含其他添加剂,比如增强剂或保护剂,以提高PCR的效率和稳定性。跨膜蛋白在宿主细胞中的表达水平通常有点低,研发困难,对蛋白表达生产平台技术要求极高。Hsp70-derived octapeptide
可以利用现有的计算工具,如CRISPR design tools,预测gRNA的活性和特异性,以辅助实验设计 。Recombinant Human CD74/DHLAG (His Tag)
PCR抑制剂是指那些在PCR反应中能够干扰或阻碍DNA扩增的物质。这些物质通常来源于生物样本本身或者样本的收集和处理过程。以下是一些PCR抑制剂的特点:1.**多样性**:PCR抑制剂可以是多种不同的化合物,包括胆酸盐、尿素、血红素、酚类化合物、蛋白质、多糖、植物或血液成分等。2.**来源**:它们可能来自血液(如血红素)、尿液(如尿素)、粪便(如胆酸盐)、植物(如多酚和多糖)、土壤(如腐殖酸)或化学物质(如酚类化合物)。3.**影响**:抑制剂可以影响DNA聚合酶的活性,干扰引物的退火,或与DNA模板发生非特异性结合,导致PCR扩增效率降低或特异性下降。4.**复杂性**:由于样本来源的复杂性,不同的抑制剂可能需要不同的策略来克服。某些抑制剂可能通过物理方法(如离心、过滤)去除,而其他抑制剂可能需要化学处理或使用特定的PCR增强剂。5.**浓度依赖性**:抑制效果通常与抑制剂的浓度有关。在较低浓度下,某些抑制剂可能不会影响PCR,但随着浓度增加,抑制效果会变得更加明显。6.**特异性**:某些抑制剂可能对特定的DNA聚合酶或PCR体系有特定的影响。例如,一些抑制剂可能特别影响高GC含量的模板扩增。Recombinant Human CD74/DHLAG (His Tag)
Recombinant Human ROBO4 Protein(His Tag)是解析血管生成调控机制的高活性工具蛋白。ROBO4属于跨膜受体家族,专一表达于血管内皮细胞,通过识别Slit2等配体稳定血管屏障、抑制病理性新生血管,在糖尿病视网膜病变与病转移中具有双重调控作用。该重组蛋白采用HEK293表达体系,保留天然胞外Ig-like结构域(氨基酸31-468),C端6×His标签确保一步Ni-NTA纯化后纯度≥98%(SDS-PAGE/HPLC验证)。体外实验显示,其可竞争性阻断Slit2诱导的内皮细胞迁移(IC₅₀=28 nM),并通过抑制VE-cadherin磷酸化增强血管完整性。低内...