培养液的渗透压是一个非常重要的因素,细胞通常可耐受260mOsm/kg~320mOsm/kg。标准培养液的渗透压在此范围内波动。特别注意:向培养液中加入其它物质有可能会明显改变培养液的渗透压,特别是溶于强酸或强碱中的物质。向培养液中添加HEPES时需按以下方法调节钠离子浓度。缓冲系统大多数细胞所需pH在-。但是,细胞培养适pH值随培养的细胞种类不同而不同。成纤维细胞喜欢较高pH(-),而传代转化细胞系则需要偏酸pH(-)。由于多数培养液靠碳酸氢钠(NaHCO3)与CO2体系进行缓冲,因此,气相中的CO2浓度应与培养液中碳酸氢钠浓度相平衡。如果气相或培养箱空气中CO2浓度设定在5%,培养液中NaHCO3的加入量为;如果CO2浓度维持在10%,培养液中NaHCO3的加入量为。细胞培养瓶盖不应拧得太紧,以保证气体交换。HEPES是一种非离子缓冲液,在pH-范围内具有较好的缓冲能力,但是非常昂贵,在高浓度时对一些细胞可能有毒。HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠()共用,以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。在这种培养条件下,细胞培养瓶的盖子应拧紧,以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中。大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂,酸性培养液呈橙黄色,碱性培养液呈深红色。RPMI RPMI 1640 培养基相比其他培养基之所以具有独特的效果,是因为其中含有还原剂谷胱甘肽和高浓度的维生素。海南华晨阳细胞培养基供应商家
细胞培养基的种类按照细胞培养基的发展历史,细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成,它的作用是维持细胞渗透压平衡,保持pH稳定及提供简单的营养。其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。几种常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's与Hank's的一个主要区别是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因为Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成份,参与细胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免细胞结团。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液,前者缓冲能力较弱,适合于密闭培养;后者缓冲能力较强,适合于5%CO2的培养条件。表1-1几种常用的BSS配方。辽宁昆虫细胞培养基全国发货Ham’s F-12营养混合物(Ham’s F-12 Nutrient Mixture)初用于CHO细胞的无血清培养。
BGJb培养基BGJb培养基是由Fitton-Jackson改良的BGJ培养基,用于大鼠胚胎长骨的培养。
BGJb培养基能为胚胎骨骼提供有利的生长和钙化环境。
华晨阳的培养基含有多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等多种成分,但不含蛋白质、脂类或任何生长因子,故此产品需搭配血清或无血清添加物使用。
注意事项:本产品经过滤除菌,使用时应注意无菌操作,避免污染;
为保持本产品的比较好使用效果,请勿进行冻融处理;本产品用于科研或进一步研究使用,不用于诊断。
CMRL培养基是由康诺特医学研究室(ConnaughtMedicalResearchLaboratories)设计出来的,初用于L细胞(Earle)的无血清培养。CMRL培养基添加马血清或小牛血清后,特别适用于猴肾细胞的克隆培养以及其他哺乳动物细胞系的培养。本产品含有多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等多种成分,但不含蛋白质、脂类或任何生长因子,故此产品需搭配血清或无血清添加物使用。注意事项本产品经过滤除菌,使用时应注意无菌操作,避免污染;为保持本产品的比较好使用效果,请勿进行冻融处理;本产品用于科研或进一步研究使用,不用于诊断和。RPMI-1640培养基初是为淋巴细胞培养专门设计的,现在已应用于各种正常细胞ai细胞的培养。
门)冬氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸和甘氨酸7种NEAA,能降低细胞培养时细胞自身生产非必须氨基酸的副作用,有效促进细胞增殖代谢。葡萄糖可以根据研究需要,随意调节葡萄糖的浓度,方便快捷。高糖型培养基普遍应用于生长快、粘附性低的细胞、杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、各种原代病毒宿主细胞、单一细胞的培养以及疫苗的生产,例如利用CHO细胞表达EPO和生产乙肝疫苗。低糖培养基更适合代谢作用较慢、依赖性贴壁细胞的培养。HEPES是一种优良的生物缓冲剂,对细胞无毒性作用,添加HEPES的培养基能够较长时间保持恒定的PH范围,可以有效的防止培养液PH波动较大对细胞生长产生不利的影响。可用于无CO2培养箱。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂,用以持续监测培养液的酸碱度,在低PH值时酚红使培养液呈黄色,而较高的PH值时使培养液呈紫色,PH值~,**适合细胞培养。但酚红也有一些缺点,研究表明酚红可以模拟固醇类***(特别是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的细胞时(如乳腺组织),**好使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外,一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。M199有两种平衡盐成分,Earle’s盐成分常用于CO2环境,Hank’s盐成分用于非CO2的环境。贵州医用细胞培养基源头直供
McCoy’s 5A培养基还用于组织活检培养、细胞建系,以及一些淋巴细胞和较难培养的细胞的培养。海南华晨阳细胞培养基供应商家
RPMI-1640细胞培养基是改进型的McCoy‘s5A培养基,使用碳酸氢盐缓冲系统,与大多数哺乳动物细胞培养基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培养基常初是为淋巴细胞培养专门设计的,现在已广泛应用于各种正常细胞和ai细胞的培养,包括HeLa细胞、Jurkat细胞、MCF-7细胞、PC12细胞、PBMC细胞、星形胶质细胞和ai细胞,是使用常为广的培养基之一。
RPMI-1640细胞培养基L-谷氨酰胺(Glutamine)是细胞培养中所必需的一种营养元素,但其在溶液中不稳定,会自发降解,不含L-谷氨酰胺的培养基,可以根据研究需要任意调整L-谷氨酰胺的用量,在使用时添加新鲜的L-谷氨酰胺或其替代物更利于细胞的生长。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。Alanyl-glutamine,Ala-Glu),又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽,是一种高级细胞培养添加剂,可直接替代细胞培养基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺(Glutamine)是细胞培养中所必需的一种营养素,但其在溶液中不稳定,会自发降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨对细胞有害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的稳定,不会自发的降解。 海南华晨阳细胞培养基供应商家
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