Recombinant Human IFN alpha/beta R1 Protein

Endo H糖苷内切酶H：结构、功能及其在糖生物学中的应用摘要Endo H糖苷内切酶H（Endo H）是一种专门切割N-连接糖链的内切酶，用于糖生物学和蛋白质工程领域。本文将探讨Endo H的结构特性、催化机制、以及其在研究和临床应用中的潜力。引言N-连接糖基化是一种在真核细胞中普遍存在的蛋白质修饰方式，涉及将糖链添加到蛋白质的天冬酰胺残基上。Endo H作为一种内切酶，能够特异性地识别并切割N-连接糖链中的β-N-乙酰葡糖胺苷键，从而在蛋白质工程和生物制药中发挥重要作用。Endo H的结构特性Endo H通常来源于流感嗜血杆菌（Hemophilus influenzae），其分子质量约为50 kDa。该酶由两个结构域组成：一个负责识别糖链的催化结构域和一个有助于酶稳定性的非催化结构域。催化机制Endo H的催化机制涉及对N-连接糖链的特异性识别和切割。酶的活性位点含有多个氨基酸残基，这些残基与糖链的特定结构相互作用，导致酶对底物的高特异性。Endo H催化的糖苷键断裂是一水解反应，需要水分子的参与。肠激酶能够特异性识别并切割含有Aspartate-Aspartate-Aspartate-Lysine (DDDK) 序列的蛋白质。Recombinant Human IFN alpha/beta R1 Protein,His-Avi Tag

大肠杆菌系统通常是小分子细胞质蛋白或结构域表达的宿主。用大肠杆菌生产蛋白质，由于只需要简单的培养基和条件，因此费用低且方便。此外，除了无细胞表达，它是速度的系统，大肠杆菌倍增时间（约20min）比酵母（2h）、昆虫细胞和哺乳动物细胞都快。一般来说，在大肠杆菌中表达重组蛋白包括：1.将一个编码目标蛋白的质粒导入宿主菌；2.培养细胞至对数生长期；3.诱导蛋白表达。选择合适的表达载体合适的宿主选定后，相应的有许多工程化克隆位点和用于驱动蛋白表达的非编码序列的载体可用。启动子通常是可诱导的，以在细胞生长到合适的密度前阻止目标蛋白表达。大部分载体还提供目标蛋白与一系列蛋白标签构建融合蛋白的选择。常用的大肠杆菌表达载体分为以下两大类：E．coliRNA聚合酶转录的载体Recombinant Rhesus macaque IL-18 R1/CD218a Protein,hFc Tag这类蛋白质在细胞的信号传递、物质转运、细胞间识别等多种细胞功能中扮演着重要的角色。

RecombinantBiotinylatedHumanHLA-A*03:01&B2M&KRASG12V(VVGAVGVGK)MonomerProtein,His-AviTag性能参数分子别名（Synonyms）MHC;KRAS;K-Ras2;KRAS2;C-K-RAS;CFC2;K-RAS2A;K-RAS2B;K-RAS4A;K-RAS4B;KRAS1;KRAS2;NS;NS3;RASK2;GTPaseKras;KI-RAS;RALD表达区间及表达系统（Source）BiotinylatedHumanHLA-A*03:01&B2M&KRASG12V(VVGAVGVGK)MonomerProteinisexpressedfromHEK293withHistagandAvitagattheC-TerminusItcontainsGly25-Thr305(HLA-A*03:01),Ile21-Met119(B2M)andVVGAVGVGKpeptide.[Accession|NP_002107.3(HLA-A*03:01)&P61769(B2M)&VVGAVGVGK]分子量大小（MolecularWeight）TheproteinhasapredictedMWof50.09kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto51-60kDabasedonSDS-PAGEresult.（Endotoxin）Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.纯度（Purity）>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC.制剂（Formulation）Suppliedas0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).

胶原蛋白是哺乳动物体内含量多的功能性蛋白[1]。胶原蛋白由3条α链的多肽链亚基组成，α链自身构型为左手螺旋，三条α链又互相缠绕成右手螺旋结构，即胶原蛋白的“胶原域”[2]。胶原蛋白的一级结构分析结果显示，其肽链由(Gly-X-Y)n组成，其中X通常是脯氨酸，Y通常是羟脯氨酸[3]。按照胶原蛋白发现的先后顺序，可将其分为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型等28种胶原蛋白[4]，Ⅰ型胶原蛋白分子组成为[α1(Ⅰ)]2α2(Ⅰ)，主要分布于骨骼中[5]；Ⅱ型胶原蛋白由[α1(Ⅱ)]3组成，主要由软骨细胞产生，因其含有大量赖氨酸残基，因而糖基化率较高[6]；Ⅲ型胶原蛋白分子组成为[α1(Ⅲ)]3，因含半胱氨酸所以肽链间形成二硫键，因此其本身就可形成细纤维，Ⅲ型胶原蛋白血管中含量较高，主要存在于肺泡间质中且分布杂乱，因而形成复杂的网状结构，正是这种结构使得肺组织具有良好的柔韧性与弹性，并且可以为细胞提供充足养分，使得皮肤饱满透亮[7]。透明质酸的衍生物可以作为基因传递的载体，或用于疫苗佐剂，增强反应。

SARS-CoV-2,whichcausestheglobalpandemiccoronavirusdisease2019(Covid-19),belongstoafamilyofvirusesknownascoronaviruses.TheSARS-CoV-2Sproteinisaglycoproteinthatmediatesmembranefusionandviralentry.TheRBDofSARS-CoV-2bindsametallopeptidase,angiotensin-convertingenzyme2(ACE-2).SeveralemergingSARS-CoV-2genomeshavebeenidentifiedincludingtheOmicron,orB.1.1.529,variant.FirstidentifiedinNovember2021inSouthAfrica,theOmicronvariantquicklybecamethepredominantSARS-CoV-2variantandisconsideredavariantofconcern(VOC).TheOmicronvariantcontains15mutationsinRBDdomainthatpotentiallyaffectviralfitnessandtransmissibility.ThemajorityofthemutationsareinvolvedinACE-2bindingandOmicronbindsACE-2withgreateraffinity,potentiallyexplainingitsincreasedtransmissibility.Severalofthesemutationsarealsoidentifiedinfacilitatingimmuneescapeandreducingneutralizationactivitytoseveralmonoclonalantibodies.研究泛素-蛋白酶体途径：重组人泛素可用于研究泛素化修饰和蛋白降解过程。Recombinant Human TrkB/NTRK2 Protein,His Tag

通过使用PNGase F去除糖蛋白上的糖链，可以确定蛋白质是否发生糖基化，以及糖基化位点。Recombinant Human IFN alpha/beta R1 Protein,His-Avi Tag

分子特性：牛凝血酶的分子特性符合高比活度酶的标准，纯度达到SDS-PAGE电泳无杂蛋白条带的要求。稳定性：牛凝血酶在室温下运输稳定，在2~8℃条件下可保存3年而酶活力未有变化。应用效果：在1:2000的质量比下，牛凝血酶能有效切割蛋白，适用于科研和工业生产中的重组融合蛋白特异性断裂。讨论科研应用：牛凝血酶因其高比活度和专一性，在分子生物学、生物化学和生物工程制药研究中作为工具酶具有重要价值。临床：作为止血药物，牛凝血酶在外科手术中的应用超过100年，因其简便和高效而受到青睐6。生产优势：牛凝血酶的生产稳定性好，纯度高，不含有其他蛋白酶活性，适合大规模生产和应用。Recombinant Human IFN alpha/beta R1 Protein,His-Avi Tag