取上述200μL细胞液加入小室,下室(培养板)加入900L含有10% FBS的培养基。不同规格的小室和培养板所加的体积不同,具体参考Millicell®产品说明书。37°C孵育24至72小时,依据**细胞类型而定。孵育结束,小心取出细胞小室,吸掉小室上层培养液,PBS清洗一遍,70%酒精或者4%多聚甲醛固定5min,0.5%结晶紫(2%乙醇或PBS溶解)染色20min,然后进行第8步或者第9步。PBS清洗两次以去除多余的染料,立即用棉签擦去滤膜上层的细胞,自然静置风干。显微镜下观察滤膜下层的细胞,随机选取不同的视野计数并算平均值。结晶紫溶解滤膜下层细胞,然后用33%醋酸脱色,将结晶紫完全洗脱下来,洗脱液可在酶标仪上570nm读取OD值。这种方法可以避免视野下细胞穿透不均匀带来的误差。上海益启生物酶订购方便。松江区酶细胞培养哪家好
PET膜 (聚乙烯对苯二酸酯) 功能***,是悬挂式Millicell®***采用的膜材质 10μm超薄蚀刻膜,其中孔径为1μm规格的透明性较好,可用于直接观察。低荧光背景,低蛋白吸附,孔径齐全,不需要ECM细胞即能生长良好。是悬挂式Millicell小室的***用膜。 Millicell® 24 和 Millicell® 96 嵌套式细胞培养板及组件 精心的设计,配合电阻仪使Caco-2 等高通量实验获得稳定的比较好效果 **侵袭实验 实验目的:研究**细胞侵袭能力 本实验技术要点: 实验简介: **细胞侵袭能力检测在**学(迁移、侵袭)和免疫学(迁移、趋化)中是常规实验。 侵袭是细胞迁移的一种。细胞迁移分三种类型:趋触、趋化和侵袭。趋触是指细胞定向向一些整联蛋白或粘附蛋白受体迁移的能力,例如上皮细胞和成纤维细胞;趋化指细胞趋向于一些化学分子的特性,例如免疫细胞;侵袭通常指**细胞分泌因子降解并穿透基质胶的能力。嘉定区培养基细胞培养联系方式上海益启生物细胞转染订购方便。
细胞研究相关试剂盒 默克密理博提供一系列活细胞、全细胞和以细胞 为基础的活性检测和报告系统用于直接或间接检测。这些技术便于目标蛋白的确定,细胞信号通路和作用机制的研究。目前,针对于表观、**、代谢、信号通路等研究的**试剂盒已在国内备有现货,方便您的实验研究。 主要优点 •试剂盒中包括实验所需所有试剂,提供方便、可靠的细胞迁移、侵袭、凋亡、增殖等研究试剂盒。 •关键的信号通路蛋白活性检测试剂盒,用于细胞周期同,染色质组成,细胞活力,细胞凋亡等研究。
实验简介: 药物研究包括吸收、分配、代谢、排泄和毒性等多个方面,而吸收是第一步。这个实验在以内皮细胞通透性、药物渗透等为研究方向的课题中很常用。 常见检测细胞: 人结肠腺*细胞系 Caco-2、HT-29、Lovo、SW-480,人结肠上皮细胞 T84,狗肾上皮细胞系 MDCK,猪肾上皮细胞系LLC/PK1 等,主要模型为上皮细胞吸收、血脑屏障。 具体操作: 上皮细胞生长到细胞汇合度达80-90%时开始实验,不要超过90%,否则会影响到后续细胞单层的形成。将细胞均匀接种在小室膜上。对于24孔板和96孔板的接种密度见本文图示。上海益启生物添加剂订购方便。
常见检测细胞: **细胞(MDA-MB-231, MCF-7, HT1080, B16F10)等,用孔径为8μm的培养小室巨噬细胞、单核细胞 PMN:用孔径为5μm的培养小室内皮细胞(HUVEC)、白血病细胞 K562、骨髓瘤细胞HB124:用孔径为 3μm或5μm的培养小室 具体操作: 以配合24孔板的8μm PET膜Millicell®悬挂式细胞培养小室(cat#MCEP24H48)为例,实验周期:3-5天 复苏代数靠前的**细胞,在含有10%FBS的培养基中预先培养2-3代,待细胞汇合达到80%左右,饥饿处理18-24小时。 准备铺胶: a) 4 °C融EMC胶过夜。 b) 将细胞小室、培养板和***头等于4°C 预冷。益启生物提供专业的多种细胞检测试剂盒。嘉定区培养基细胞培养联系方式
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