SD大鼠脑缺血致脑梗死模型【材料】水合氯醛、线栓直径（体重250-300g）【方法】1、10％水合氯醛（35mg/kg）腹腔注射麻醉。2、仰卧位固定，颈正中线切口，分离肌肉和筋膜，分离左侧颈总动脉（CCA）、颈外动脉（ECA）和颈内动脉（ICA）。3、微动脉夹暂时夹闭颈内动脉（ICA），活扣结扎近心端颈总动脉（CCA）、颈外动脉（ECA）打双结，在双结中间剪开小口插入线栓。4、将拴线插入到颈内动脉（ICA），用眼科镊轻推拴线，以颈外动脉（ECA）和颈内动脉（ICA）分叉处为参考位置。5、栓线插入预刻深度，感到有阻力，说明栓线已到达脑中动脉（MCA）,打结固定栓线。6、血管外的栓线不要留得过长，1h后拔出栓线，缝合伤口，单笼饲养观察。注：前两三天老鼠会萎靡，不进食，注意不要，老鼠无死亡即可。急性肺损伤(acute lung injury，ALI)。湖南实验动物模型实验室
静置25分钟后把酒精倒干，用吸水纸吸出多余的酒精，然后配压缩胶，同样的操作，关键是梳子要插得快，要小心梳子下产生气泡，然后静置30分钟。如果是当天跑胶，我会等上层胶凝2个小时再用，但要注意防干燥缩水，可以在一个小时的时候沿着梳子上缘加点电泳液。所以我一般提前一晚制胶，泡于纯水或者电泳液里置于4度冰箱暂存。三、蛋白电泳1、上样前准备把胶组装到电泳芯上，注意密闭性(否则漏液)，如果内槽漏液就不是匀强电场了，条带可能就不是一条直线。然后内槽倒满电泳液，拔梳子，这一步要小心，梳子要两边一起缓缓往上拔出，然后观察泳道内有无脱落的胶粒或者胶丝，有的话用1毫升注射器吸出。然后从冰箱取出蛋白样品，解冻。准备振荡器。2、上样和电泳注意，上样后蛋白会开始慢慢在胶中弥散，所以上样越快越好。我习惯先上蛋白Marker,再上蛋白样品，蛋白上样前确保样品完全解冻和充分振荡(推荐使用振荡器振荡)，吸的时候没有拉丝即可，建议上样分钟把样品从冰上取出来，不然样品中SDS可能会结晶析出，从而影响电泳效果。上层胶80V25分钟，下层胶120V65分钟。四、转膜1、转膜前准备我会在电泳结束0分钟准备，把转膜液配好置于4度冰箱预冷，然后裁膜，准备转膜装置。湖北豚鼠动物模型构建好的动物模型能够较好地模拟疾病状态，为的研究提供可能。
酒精性肝病(AH)大鼠模型建模方法【方法】1、正常组大鼠自由饮水。2、酒精性脂肪肝(alcoholicfattyliverdisease，AFL)模型组大鼠自由饮用酒精饮料，其酒精浓度从5%开始，每个浓度维持一周，依次改为10%、15%、20%、25%、30%、35%至40%，以40%浓度持续至12周。3、在实验过程中，各组大鼠均给以普通颗粒饲料，共持续为12周。4、第12，动物禁食12h，称重，下腔静脉取血处死，血液离心取上清备用。【检测】1、生化指标检测检测ALT、AST、TC、TG、FFA、LDL-C、HDL-C和血糖的含量。2、组织病理学酒精性脂肪肝模型组大鼠肝脏体积增大，明显肿胀，包膜紧张，边缘圆钝，呈奶黄色，切面油腻，腹腔内尤以有腹膜后脂肪堆积明显。HE染色显示，正常组肝脏内无明显脂肪变性，肝小叶结构正常，肝细胞索围绕静脉呈放射排列。模型组肝脏弥漫大量脂肪变性，细胞体积增大，呈气球样变。3、标志因子水平ELISA法测定血清中TNF-α和ApoB的含量。
应根据所检测指标的要求，需采取不同策略处理。在如今分子生物学当道的现实背景下，动物实验除了对实验动物的体征及生理指标进行的监控外，各种分子检测甚至是组学检测也开始大行其道，动物实验结束之后的机制研究成为了实验的重头戏。一般来说，动物实验检测对象主要包括：（1）体液中各类因子定性及定量检测由于此类检测对象多为蛋白及各类小分子物质，因此在取样过程中应注意防止此类物质降解，在获取后，应及时置于温（≤-80℃）进行保存，在后续实验过程中，也应当注意保存条件的稳定性，避免反复冻融。常用的方法便是酶联免疫吸附测定（ELISA），除此之外，可利用生化分析仪及不同检测方法的试剂盒（比色法、比浊法等）方法对各类生化指标及因子进行定性及定量检测。（2）组织病理、生理变化及免疫组化检测常用的病理检测多使用H&E染色对细胞质及细胞核进行染色标记，以观察细胞变化。除此之外，许多特殊染色也在病理生理变化中得到了应用，如利用Masson染色检测组织纤维化病变，Nissl染色检测神经元损伤，β-半乳糖甘酶染色检测细胞衰老等。此外，还可以通过免疫组化技术对某些特异性标记物进行免疫显色检测，达到原位定性或定量检测的目的。。恶性黑色素瘤是起源于神经嵴的黑色素细胞恶性。
所述高原光照环境模拟装置15包括可见暖光系统和照明亮度无极控制系统，所述可见暖光系统设置饲养仓2顶部。本实施例的工作原理:本系统集成了可见暖光系统(可模拟高原红外线和紫外线)与照明亮度无极控制系统，需要灯光时，可通过灯光系统开启紫外灯以及照明灯，并可根据所需实现亮度调节，通过日光灯加紫外线灯来实现高原高紫外线光照环境。实施例5在实施例1的基础上提供的一种高原性人类疾病模型制备环境模拟系统，所述高原温度环境模拟装置16包括降温系统、升温系统、温控系统和温度采集显示系统。本实施例的工作原理：本系统配置降温系统、升温系统、温控系统与温度采集显示系统使系统内温度可无极调控，以保障海拔(3000m～7000m)高原温度环境进行模拟，温度调节通过冷暖风机来实现，就是和空调一样的原理。实施例6在实施例1的基础上提供的一种高原性人类疾病模型制备环境模拟系统，所述高原湿度环境模拟装置17包括加湿系统、除湿系统、湿度控制系统和湿度采集显示系统。本实施例的工作原理：本系统配置加湿系统、除湿系统、湿度控制系统与湿度采集显示系统使系统内湿度可无极调控，以保障海拔(3000m～7000m)高原湿度环境进行模拟。胆管结扎诱导炎症性肝损伤和肝纤维化小鼠模型。皮下成瘤动物模型建模
采用复合改良法造模,是目前 IgA 肾病中较为可靠、稳定、成功率高,且病理、临床指标近人类 IgA 肾病的动物模型。湖南实验动物模型实验室
经多级乙醇至水洗：二甲苯(i)5min→二甲苯(ⅱ)5min→100％乙醇2min→95％的乙醇1min→80％乙醇1min→75％乙醇1min→蒸馏水洗2min；4)苏木素染色5分钟，自来水冲洗；5)盐酸乙醇分化30秒；6)自来水浸泡15分钟；7)置伊红液2分钟。8)常规脱水，透明，封片：95％乙醇(i)1min→95％乙醇(ⅱ)1min→100％乙醇(i)1min→100％乙醇(ⅱ)1min→二甲苯石碳酸(3：1)1min→二甲苯(i)1min→二甲苯(ⅱ)1min→中性树脂封固。9)显微镜下拍照。结果发现在4个月时，与ctrl(对照)小鼠比较，sixko小鼠的视网膜外核层已经开始变薄，表明感光细胞死亡(图7)。实施例5视网膜冰冻切片免疫染色：取4月龄的由实施例2得到的gm20541基因敲除纯合子小鼠断颈处死后，快速取眼球，并放入4％的pfa中，冰上固定15min后，在角膜上剪口，然后继续冰上固定。2h后，pbs缓冲液冲洗3遍，然后将眼球置于30％蔗糖溶液中脱水2h，然后解剖镜下剪去角膜及晶体，oct包埋并迅速置于-80℃冰箱冷冻。大约10min后，取出oct包埋的眼球，置于冰冻切片机-25℃平衡约30min后即可切片。切片厚度为12μm。切片完成后，选取质量较高的片子于37℃烘箱放置30min，然后免疫组化笔在有视网膜组织的地方画圈，pbs洗三遍以去除oct。湖南实验动物模型实验室
