紫外可见分光光度计和荧光分光光度计都经常用于样品定量。使用紫外可见分光光度计进行定量时基于朗伯比尔定律,测定的吸收值一定范围内与样品浓度成正比。另一方面,利用荧光分光光度计时,使用荧光强度。在低浓度时,荧光强度与浓度成正比,所以,可以用于定量。本次使用紫外可见分光光度计和荧光分光光度计两台仪器分别测定了罗丹明B溶液。罗丹明B是用于纤维和皮革的染色的荧光物质。关于测定结果,对两个机种的定量、检测下限值和标准曲线的线性度进行了比较,下面将进行介绍。1紫外1罗丹明B溶液的吸光度测定使用了紫外可见分光光度计UV-260Oi测定样品吸光度。将粉末状的罗丹明B溶解在蒸馏水中,调配~5ug/ml的标准溶液。科学家常用光度计研究光源。广东元析光度计推荐
由于仪器的制造和调整误差,单色光的实际波长与仪器的波长读数值间都存在一定的误差。样品中绝大部分的主要吸收峰都有一定的宽度,对波长准确度要求允许宽些。但是,当吸收峰宽度较小,而且吸收峰两侧边缘比较陡直,此时波长准确度的影响就必须引起注意。2、透射比(吸光度)准确度很显然,透射比或吸光度的误差越大,测试结果的可信性越差,从而影响到测试数据的准确性。3、杂散光杂散光是由于光学元件制造误差以及光学和机械零件表面的漫反射形成的。杂散光是分析样品的非吸收光,随着样品浓度的增加,杂散光的影响也随之增大,将给分析结果带来一定的误差。在紫外的短波区域光源强度和检测器的灵敏度均明显减弱,杂散光的影响更不能忽视。因此,杂散光的大小也是仪器性能的一项重要指标。使用与维护1、若大幅度改变测试波长,需稍等片刻,等灯热平衡后,重新校正“0”和“100%”点。然后再测量。2、指针式仪器在未接通电源时,电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况,需进行机械调零。3、比色皿使用完毕后,请立即用蒸馏水冲洗干净,并用干净柔软的纱布将水迹擦去,以防止表面光洁度被破坏,影响比色皿的透光率。4、操作人员不应轻易动灯泡及反光镜灯。重庆元析光度计操作光度计可以用来研究光的散射、反射和吸收等现象。
一些仪器具有多种光源供选择:紫外光、可见光和甚至红外光(780nm至3,000nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380nm到800nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。分光光度计的带宽(bandwidth)很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。为了测量吸光值,分光光度计制造商通常使用光电倍增管(photo-multipliertubes,PMTs)和光敏二极管。
PMTs提供快速的反应时间和良好的灵敏度,并且可以在紫外光谱调节至特定的范围。但一些制造商依赖于光敏二极管的动态范围在数秒内行使所有的光谱测量。在大部分的样品类型中,分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。微孔板主要是满足高通量的需要和大规模的实验室需求。但尽管对于小实验室来说,制造商仍然提供了多种容器转换器来满足通量的要求和减少实验时间。用小试管cuvette装样品容量一般从1μl-5ml,并且一些仪器装备了各种样品的固定物来满足各种改变需要。光度计的校准对于保证测量结果的准确性非常重要。
光度计通常由光源、样品室、检测器和显示器等组成。光源可以是白炽灯、氘灯、钨灯等,不同的光源适用于不同的波长范围。样品室是放置样品的地方,通常是一个透明的容器。检测器可以是光电二极管、光电倍增管等,用于测量光的强度。显示器用于显示测量结果。在使用光度计进行测量时,首先需要校准仪器。校准是为了确保测量结果的准确性和可靠性。校准通常是通过测量已知浓度的标准溶液来进行的。校准后,可以进行样品的测量。在测量过程中,需要选择合适的波长。不同的物质对不同波长的光有不同的吸收特性。因此,选择合适的波长可以提高测量的准确性。在选择波长时,需要考虑样品的特性和测量的目的。光度计可以帮助医生诊断眼部疾病。河南原子吸收光度计操作
光度计的读数需要转换为实际单位。广东元析光度计推荐
在物理学领域,光度计应用于光学研究。它可以用来测量光的强度、光的波长和光的偏振状态。光度计可以帮助研究人员了解光的行为和性质,从而推动光学技术的发展。在化学领域,光度计被用于测量溶液中物质的浓度。通过测量溶液对特定波长光的吸收,可以确定溶液中物质的浓度。这对于化学分析和质量控制非常重要。光度计还可以用于研究化学反应的动力学和热力学性质。在生物学领域,光度计被应用于生物分子的测量和分析。例如,DNA和蛋白质的浓度可以通过测量它们对特定波长光的吸收来确定。这对于基因测序、蛋白质分析和生物医学研究非常重要。光度计还可以用于细胞培养和细胞增殖的监测。广东元析光度计推荐