在使用预装培养基时,装有培养基的容器需要以适当的温度存储,不要将其暴露在阳光下或在高温环境中存储。因为温度过高会致使培养基变质,影响实验效果。而温度过低则会导致细胞生长缓慢,也会影响实验效果。因此在使用前需要查看培养基的理想存储条件,进行妥善的保存。当使用预装培养基时,需要进行无菌操作。先用手或棉花球蘸上医用酒精、经冷却压缩器或火烧消毒的铁钻区外部表面消毒,再取样放入容器或烧杯中。在转移前,需要仔细消毒取样的容器或烧杯,以保证悬浮在空气中的细菌和病毒不会在样品中繁殖,造成别样的影响。某些培养基会在特定环境下产生特定的表型变化,例如MacConkey培养基生成红色菌落表示肠道杆菌的存在。CIN1培养基基础
在保存干粉培养基时还需要注意以下注意事项:尽可能缩减干粉培养基长时间不间断存储。因为长时间不使用,尤其是室温下,会受到光照、湿度等自然环境的影响,温湿度波动,会产生不稳定的物理与化学效应,导致化学反应发生,细菌及其他微生物生长。在保存时使用密封包装进行,使其隔绝空气和水分及其他微生物的进入。及时检查干粉培养基的保质期,避免超过保质期的使用,影响实验结果。准确记录干粉培养基的配方,标签上应说明干粉培养基的名称、生产日期、有效期,混合使用指导,以方便日后使用。酪胨琼脂(G.A)培养基的配方也会受到环境、药物和其他外部压力的影响,因此,在实际应用中需要不断进行调整和改进。
在制备培养基的过程中,安全是第1原则。要保证培养基的无菌性、无致病性、无致变性,避免应用医疗性维生素、肽聚糖、半合成血清等,以避免在细胞培养等实验过程中产生的杂菌和微生物的病变,对实验过程的准确性和可靠性产生不利影响。培养基中含有营养成分,必须考虑基本食物成分(水、碳水化合物、蛋白质、脂肪、维生素、微量元素等)作为通用要素。不同类型的生物需要不同的营养成分,因此在制备培养基时必须注意保证各种营养成分的均衡和充足,以确保生物体生长、繁殖的需要和生理上的健康状况。
制备培养基需要哪些材料?溶菌酶:溶菌酶是一种水解酶,可以分解大多数细菌细胞壁,促进菌落生长。溶菌酶通常与其他元素一起添加到培养基中,以加快菌落的生长速度和密度。营养物质:营养物质是细胞生长和减少细胞死亡所必需的化学元素和化合物。培养基中添加的营养物质包括氨基酸、糖类、维生素、核酸等。这些化合物可以提供细胞所需的能量和原料,促进细胞和菌落的生长。染色剂:染色剂是一类化学试剂,多用于细胞和菌落的研究中。常见的染色剂包括甲基红、溴菲尔蓝、乙酸洋红等。这些染色剂可以用于观察细胞生长和分化、菌落密度、代谢水平和产物含量等。培养基的pH值需要根据不同微生物的生长适应范围进行调节。
预装培养基可能对某些微生物产生毒性影响。预装培养基在生产过程中可能含有某些添加剂,例如维生素、抑菌剂和染料等,以防止微生物污染。然而,这些添加剂也可能会影响微生物的生长和生命周期。比较好的做法是在不确定是否适合使用预装培养基的情况下,可以尝试使用小批量的预装培养基来进行一些试验,以确定微生物能否正常生长。什么样的微生物较适合使用预装培养基呢?通常,较为简单的微生物,例如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等,是预装培养基的合适候选者。这些微生物有着比较简单和标准的营养需求,容易在预装培养基上生长。对于一些较为复杂的微生物,例如细菌、细胞和非典型微生物,预装培养基毫无疑问是无法满足其复杂的营养需求的。常见的培养基包括LB培养基、TSB培养基等。SB琼脂
在选择培养基之前,必须注意其抗性、生长速度和生长环境。CIN1培养基基础
基础培养基:含有基础生长所需的基本营养成分,较常用的是肉浸液,俗称肉汤,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基础培养基普遍用于细菌的增菌、检验,也是制备其他培养基的基础成分。营养培养基:在基础培养基中可加入葡萄糖、血液、生长因子等特殊成分,供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长。较常用的是血琼脂平板、巧克力血平板等。特殊培养基:包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。前者是培养专性厌氧菌的培养基,除含营养成分外,还加入还原剂以降低培养基的氧化还原电势,如疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基等。后者是针对细胞壁缺损的细菌L型,由于胞内渗透压较高,故培养基必须采用高渗低琼脂培养基。CIN1培养基基础