上海外泌体lncRNA测序

虽然外泌体作为药物载体具有生物兼容性、稳定性和内在靶向性等潜在优势，但是外泌体在药物递送中的应用研究才刚刚起步，尚有许多问题需解决：选择何种细胞作为外泌体的供体：如DCs来源的外泌体可用于免疫治理，因其富含组织相容复合物（MHC）及T细胞共刺激分子，能在体内唤醒T淋巴细胞，进而抑制瘤细胞增殖；骨髓来源的间充质干细胞（MSCs）来源的外泌体对KRAS基因有抑制作用；γδT细胞、自然杀伤细胞（NK）、瘤细胞等均有研究报道可作为载药级别外泌体的细胞来源。干细胞外泌体可用于中风的治理，改善神经预后，增加血管与神经生成。上海外泌体lncRNA测序

外泌体起源于多泡体,以细胞管腔内囊泡的形式存在.细胞的胞吞形成带有外源性抗体的内体小泡,在高尔基体等细胞器的作用下形成早期核内体,早期核内体的囊膜内陷、突入形成多个小囊泡,并选择性的接受细胞内的蛋白质、核酸、脂类等成分,较终形成晚期核内体,晚期核内体与细胞膜融合,并将外泌体排出胞外。这是一个连续而又复杂的过程,从内体小泡到成熟外泌体,需要在各细胞器间传递并包装,包括:TSG101、Alix蛋白、CD63、CD81、神经酰胺、胆固醇等。外泌体的排出跟其他胞内小泡大致相同,受到Rab家族蛋白的调控,敲除细胞的Rab27a和Rab27b蛋白后,外泌体不能排出,且从高尔基体到晚期核内体的囊泡运输不受影响。外泌体之家利用外泌体将siRNA和抗药剂等运输到目标细胞中。

Exosome（外泌体）是由活细胞分泌小囊泡，具有典型的脂质双分子层结构；参与细胞之间的交流，物质的运输以及正常生理过程的维持，此外还与疾病的产生有关。对分离的外泌体进行体外标记或示踪，有助于对外泌体的功能进行进一步的研究。目前对于外泌体的标记方法有很多种，包括亲脂性的染料和膜渗透型的化合物等。PKH67的体内荧光半衰期为10-12天。相比于PKH-67，PKH-26具有更长的半衰期，标记在兔红细胞上的PKH26半衰期长达100天以上。特别适用于体外增殖研究以及长期的体内细胞跟踪研究。

外泌体可以调控星状细胞（HSC）活化，并参与HSC细胞迁移的进程。活化的HSC来源的外泌体中，CCN2表达升高，Twist1和miR-214表达被抑制，这些外泌体还能诱导静止的HSC细胞表达CCN2。此外，Twist1可以诱导miR-214表达从而抑制CCN2的表达。CCL4处理的外泌体和外泌体SK1/S1P会诱导HSC迁移。MSC分泌的外泌体可以有效减缓肝纤维化过程，这可能成为肝纤维化治理的靶点。研究显示，CP-MSC来源的外泌体miR-125b可以抑制Hedgehog信号通路的活化，抑制纤维化；而HUC-MSC分泌的外泌体可以逆转细胞形态和TGF-β1诱导的EMT进程，减弱肝纤维化。外泌体能负载的治理物质包括小分子化合物、蛋白质、寡核苷酸等，且在体液中宽泛分布且具有定向归巢能力。

流式细胞技术针对外泌体的表面抗原标记物进行检测，能够实现外泌体的高通量、多通道分析。但是由于外泌体的粒径小、折射率低，所以采用常规的流式细胞仪进行检测时往往需要将外泌体与beads连接以增大表面积、增强反射，操作耗时又费力。Tian等搭建了一种高灵敏度的流式细胞仪(HSFCM)，将可检测的外泌体粒径降至40nm，能够在不连接beads的情况下实现每分钟10000个外泌体的检测，并且能够结合免疫荧光的方法进行外泌体标志蛋白质的定量检测，目前该仪器已商品化。细胞分泌到细胞外环境中分别称为外泌体和微泡的细胞外膜泡。外泌体之家

外泌体可参与到机体免疫应答、抗原提呈、细胞迁移、细胞分化等方方面面。上海外泌体lncRNA测序

已经有许多关于外泌体作用的报导，根据这些现象实验中，从体液和培养上清中高纯度提取的高纯度外泌体，在活内是否真的能发生作用尚未能确定。确认外泌体生理作用的单独方法就是明确外泌体的释放机制，通过促进或压制释放机制，分析会引起何种生理作用，这是进一步研究的发展方向。甚至活内的外泌体动态（哪个外泌体迁移至何处）也会成为今后需要努力研究的重要课题。实际上，用PS亲和法提取的人白血病细胞释放的外泌体，其纯度与超离心法和PEG沉淀法提取外泌体做比较，PS亲和法提取的外泌体，其蛋白特异性检测可高出10~100倍以上，几乎没有混入外泌体以外的蛋白，回收量高，操作重复性好。上海外泌体lncRNA测序

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