广西培养基消毒 培养基制备仪

培养基防止污染应该注意以下事项：确认工作细胞库是否被污染，确认毒种工作种子批是否被污染，确认所用培养基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染，均可用细菌、病菌及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中，可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养，48小时即可观察有无污染。其它：高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证，确保灭菌和除菌效果;前者应在投产前及其后的每6个月进行验证，后者应在每次除菌前、后进行验证工作(至少应在除菌后进行一次)。另外，应将有毒区与无毒区严格分开，并有各自自立的空气净化系统及孵室，有毒区对无毒区应保持相对负压，防止病毒对培养细胞(尤其是细胞库)的污染。平板培养基要除去冷凝水，否则将影响平板分离培养效果。广西培养基消毒 培养基制备仪

固体斜面培养基配制：培养基各成份的混合和溶化：培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。较好使用不锈钢莴加热溶化，可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动、以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用，应重新制备。待大部分固体成分溶化后，再用较小火力使所有成分完全溶化，迄至煮沸。如为琼脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后将两溶液充分混合。在加热溶化过程中，因蒸发而丢失的水分，较后必须加以补足。培养基pH的初步调正：因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化，培养基各成分完全溶解后，应进行PH的初步调正。四川触摸屏培养基制备仪液体培养基，80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性的营养成分的培养基。

微生物发酵培养基配制注意事项：①养分浓度和配比合适：微生物只有在培养基中养分浓度合适的情况下才能生长良好是合适的。当养分浓度过低时，不能满足微生物正常生长的需要。②微生物培养基pH条件控制：培养基的pH必须控制在一定范围内，以满足不同种类微生物的生长繁殖或产生代谢物。各种微生物生长繁殖或代谢产物产生的较佳pH条件不同。通常细菌和放线菌适合在7~7.5pH范围内生长，酵母菌和霉菌一般在4.5~6pH范围内生长。③微生物培养基原料来源选择：培养基配制时，应尽可能使用低廉易得的原料作为培养基成分。尤其在发酵行业，培养基用量大，使用成本较低原料实现产品附加价值。例如在微生物单细胞蛋白的工业化生产过程中，制糖业含蔗糖废液、乳业含乳糖废液、大豆废液工业和黑色废物、造纸工业中含有戊糖和己糖的亚硫酸盐纸浆等经常被作为培养基原料使用。④成品培养基灭菌处理、为了获得微生物的纯培养物，必须避免被细菌污染，所以对使用的设备和工作场所进行消毒和消毒。对于微生物培养基要进行严格的灭菌处理。

马铃薯培养基的分装：1.根据需要将培养基分装于不同容量的三角烧瓶、试管中。分装的量不宜超过容器的2/3以免灭菌时外溢。2.琼脂斜面分装量为试管容量的1/5，灭菌后须趁热放置成斜面，斜面长约为试管长的2/3。3.半固体培养基分装量约为试管长的1/3，灭菌后直立凝固待用。4.高层琼脂分装量约为试管的1/3，灭菌后趁热直立，待冷后凝固待用。5.液体培养基分装于试管中，约是试管长度的1/3。6.琼脂平板：将灭菌(或加热融化)后的培养基冷至50℃左右，以无菌手续倾人灭菌平皿内，内径225px的平皿倾注培养基约13～15ml，轻摇平皿底，使培养基平铺于平皿底部，待凝固后即成，倾注培养基时，切勿将皿盖全部启开，以免空气中尘埃及细菌落入新制成的平板培养基(简称平板)，表面水分较多，不利于细菌的分离，通常应将平皿倒扣搁置于37℃培养箱内约30分钟待平板平面干燥后使用。组合培养基是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。

培养基的类型：1、根据对培养基组成物质的化学成分是否完全了解来区分,可以将培养基分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。(1)天然培养基：天然培养基是指利用各种动、植物或微生物的原料,其成分难以确切知道。用作这种培养基的主要原料有:牛肉膏、麦芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麸皮、各种饼粉、马铃薯、牛奶、血清等。用这些物质配成的培养基虽然不能确切知道它的化学成分,但一般来讲,营养是比较丰富的,微生物生长旺盛,而且来源多方面,配制方便,所以较为常用,尤其适合于配制实验室常用的培养基。这种培养基的稳定性常受生产厂或批号等因素的影响。(2)合成培养基合成培养基是一类化学成分和数量完全知道的培养基,它是用已知化学成分的化学药品配制而成。这类培养基化学成分精确、重复性强,但价格昂贵,而微生物又生长缓慢,所以它只适用于做一些科学研究,例如营养、代谢的研究。(3)半合成培养基。培养基中营养物质的浓度过大，会使渗透压过高，使细胞发生质壁分离而抑制微生物生长。广西培养基消毒 培养基制备仪

为了避免杂菌污染，获得微生物纯培养物，培养基必须及时严格灭菌。广西培养基消毒 培养基制备仪

培养基制备器：主要应用于液体培养基及微生物培养基的培养基制备器。高效的加热和冷却，良好的加热元件能确保快速加热。培养基容器外壁的水循环能保证快速冷却。通过热交换器不断地将热的去离子水冷却。总循环时间为60至120分钟，包括加热、灭菌和冷却，具体时间取决于容器的大小，培养基的量和冷却水的温度。无菌过滤的支持压力可以防止培养基发泡或溢沸。触摸屏技术，新使灭菌器操作起来有了更多的选择，增加了灵活性。加塞后，将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道线绳或橡皮筋扎好，用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。广西培养基消毒 培养基制备仪

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