上海外泌体脂质组学

尺寸排除色谱法是使用聚合物凝胶或类似的固定相柱进行外泌体分离的技术,样品以重力滴落的方式收集。流体力学半径较小的样品组分进入凝胶孔隙后,需耗费相对较长的时间通过凝胶柱,导致延迟洗脱,实现不同粒径大小颗粒分离。尺寸排除色谱法可以与差速离心法结合而不会明显损失外泌体,保证产量的同时可有效去除杂质蛋白,更适合目标蛋白质组学和miRNA的分析。静水过滤透析法主要利用静水压力迫使样品中不同特定大小分子先后通过透析管,其中溶剂和小溶质很容易通过透析管,而较大的颗粒,如外泌体和其他囊泡,仍留在透析管中而被收集。免疫印迹或蛋白质印迹是分析外泌体较常用的方法之一，其原理是外泌体上特异性抗原与抗体结合。上海外泌体脂质组学

一类外泌体中常见的细胞质蛋白是Rabs蛋白，是鸟苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一种。它可以调节外泌体膜与受体细胞的融合，有文献报道称RAB4,RAB5和RAB11主要出现于早期以及回收的核内体中，RAB7和RAB9主要出现于晚期的核内体。现有大量的研究发现外泌体中含有40种RAB蛋白。除了RAB蛋白，外泌体中富含具有外泌体膜交换以及融合作用的膜联蛋白（包括膜联蛋白1、2、4、5、6、7、11等）。外泌体膜上富含参与外泌体运输的四跨膜蛋白家族、热休克蛋白家族。其它一些外泌体中的蛋白包括多种的代谢类的酶、核糖体蛋白（RPS3）、信号转导因子（黑色素瘤分化相关因子,ARF1,CDC42,人类红细胞膜整合蛋白,SLC9A3R1）、粘附因子、细胞骨架蛋白以及泛素等。江西外泌体miRNA测序外泌体其纯度与超离心法和PEG沉淀法提取外泌体做比较。

外泌体的生物发生途径主要包括三个关键的检查点：ILV的形成，阻止MVEs的降解以及MVEs和细胞膜的融合，这三个检查点都包含在内体相关的囊泡运输过程中。RABGTPase定位到特定膜结构的表面，通过招募效应因子来调节相应膜结构的囊泡运输，例如，在内体溶酶体运输网络中，RAB5调节早期内体的形成及相互融合；内体膜上RAB5到RAB7的转换调节早期向晚期内体的转变；RAB7调节晚期内体/MVEs与溶酶体的融合来降解ILVs；RAB27调节MVEs与细胞膜的对接和融合来释放ILVs形成外泌体。内吞的膜蛋白，特别是受体酪氨酸激酶家族的表皮生长因子受体，定位到内体和MVEs，通过MVEs和溶酶体融合来进入溶酶体降解，此过程受多种RABGTPases和ESCRT复合体的调控。

肺病细胞来源外泌体（LCC-exosome）可以通过刺激种瘤血管的形成来促进种瘤的生长。据相关报道称，LCC-exosome中的miR-210可以通过调节基质细胞中酪氨酸受体激酶A3的含量，促进种瘤血管的生成；而LCC-exosome中的miR-23a则可以通过开启脯氨酰羟化酶及压制紧密结合蛋白ZO-1来促进肺病的生血管作用。此外，有研究发现，外泌体中的内容物可以触发上皮-间质转化（EMT）。晚期肺病患者血清中外泌体波形蛋白表达增加，促使人正常支气管上皮细胞出现EMT，从而使肺支气管正常上皮细胞出现增殖，迁移能力。科学家也尝试利用外泌体的压制发病机制功能。外泌体作为蛋白质的药物递送载体。

外泌体在各种疾病的诊断和治理中的应用研究火热。外泌体的复杂性，为疾病检测和监测提供了一个多指标的诊断窗口。此外，能够向病变细胞输送功能性物质的特性使外泌体有潜力作为基因和药物递送的载体。有研究总结了从外泌体中筛选的生物标志物，可用于疾病的诊断、预后及治理。外泌体在生物液体中宽泛分布，包括血液、尿液、唾液、胸腹水、脑脊液、胆汁、乳汁以及泪液等，其复杂的内容物被认为是疾病诊断的无创或微创生物标志物，具有检测包括病症在内的许多病理状况的潜力，可以用于对心血管疾病和病症等多种疾病的诊断和监测。蛋白质分子在外泌体信号传递过程中起到了非常重要的作用。galnac-sirna

科学家也尝试利用外泌体的压制发病机制功能。上海外泌体脂质组学

临床上，干细胞外泌体主要治理烧伤、烫伤、皮肤溃疡、再生健康皮肤。在护肤方面，主要是对外伤受损、衰老进行修复，比较全的调理皮肤、改善肤质，令肌肤恢复年轻、健康的状态。干细胞外泌体可以再生皮肤和强化皮肤屏障，具有比较好的再生效果，且没有其它副作用。干细胞外泌体或将成为治、特异性皮炎等宽泛炎症性皮肤疾病的一种有效且安全可靠的治理方法。如今，干细胞外泌体已在几种不同类型的疾病中显示出令人鼓舞的治理效果，包括肾损伤、心脏损伤、脑损伤和肝肺损伤等。主要机制可能是外泌体介导了MSC的旁分泌/自分泌机制。上海外泌体脂质组学

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