威斯康星米勒菌菌种

注意事项为：冻干粉菌种为菌种与脱脂奶粉溶液混合后，加入到真空冻干管里，经真空冻干制成。因菌种里面真空并且已经休眠，因此一定要按照本中心提供的说明书步骤进行活化。活化之后的菌种需要再传代2次，活力达到比较好。建议每代菌种都要做成甘油菌进行-80度冻存（厌氧菌需要在液氮条件下储存）。冻干粉菌种可以常温运输，收到后不开管可以在冷藏条件下保存3-15年。如果开管，就要马上全部用完。磁珠菌种为1代菌液与磁珠混合后，菌种充分被磁珠吸附。磁珠菌种含有12颗，可以使用12次。运输时候我们加入冰袋运输，收到后需要高温-80度冻存。乳酸菌是一类被普遍利用的菌种菌株，可被用于食品生产、商业用途等。威斯康星米勒菌菌种

pH值：发酵培养的pH值对婴儿双歧杆菌发酵液中活菌数的影响明显，在pH6.5的条件下，发酵液菌体浓度较高，lg活菌数为9.77，折算发酵液活菌数约为5.84×109 cfu/mL，表明pH值为6.5为婴儿双歧杆菌的较为合适发酵培养pH值。搅拌速度：发酵罐的搅拌转速对婴儿双歧 杆菌发酵液中活菌数的影响明显。搅拌转速提升，发酵液活菌数反而随之下降，这可能是因为婴儿双歧杆菌是厌氧菌，在发酵过程中需要厌氧环境。搅拌转速的增加，一定程度上增加了发酵体系中的溶解氧，使该菌株的生长环境发生变化所致。在转速为200 r/min条件下发酵液的lg活菌数较高达到9.93，折算活菌数为8.33×109 cfu/mL，表明婴儿双歧杆菌的较为合适搅拌转速为200 r/min。黄色列契瓦尼尔氏菌植物上的菌株包括根瘤菌、枯草杆菌、土壤放线菌等。

兼性厌氧菌冻干粉使用说明：冻干粉活化，将菌粉甩至底部，将尖头一侧用酒精消毒后敲开，取0.2-0.3ml溶解液加入至菌种管中，轻轻弹至菌粉混合均匀，用无菌吸头全部吸出溶解液，全部接种至2支含3ml液体培养基的试管中，静置培养。注意真空菌种管一旦敲开里面的冻干粉就必须全部被用掉，留着也没用。厌氧菌冻干粉使用说明：冻干粉活化，将菌粉甩至底部，将尖头一侧用酒精消毒后敲开，取0.2-0.3ml溶解液加入至菌种管中，轻轻弹至菌粉混合均匀，用无菌吸头全部吸出溶解液，全部接种至2块含培养基培养皿上培养(注意培养皿不能用封口膜封住盖子四周)。注意真空菌种管一旦敲开里面的冻干粉就必须全部被用掉，留着也没用。

铜绿假单胞杆菌的冻干菌种是经冷冻干燥并抽真空保存的，开启后必须一次使用完，不能留菌粉下次再用，另外安瓿管里大部分仍是用牛奶作为保护剂，里面菌体为少数，复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上，否则可能造成复苏不成功。菌种活化前，如要长期保藏，请将安瓿管保存在4-10摄氏度的环境下。操作前如有不明白之处，应先咨询专业人员，避免不必要的损失。菌种操作应在在无菌条件下进行；转钟完毕，废弃物应经灭菌再做丢弃处理，以免污染周围环境。复苏后，微生物菌种应保藏于建议的温度、清洁和干燥的地方，室温放置时间过长或导致菌种衰退。菌株研究的国际合作将加强知识共享和文化交流。

保存条件斜面、穿刺菌和冻干粉可常温运输，但应在4-10度长期保存，甘油菌可常温运输，但应在-80度长期保存。微生物菌种应保存于低温、清洁和干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退。冻干管的开启方法：方法一：将冻干粉甩至底部圆球位置，然后用70%的酒精脱脂棉球擦净冻干管，将冻干管的前列（注意不是圆球端）放在火焰上加热。然后迅速滴几滴无菌水至加热处，此时冻干管的前列会自动破开。然后用镊子轻轻敲下冻干管前列，并将冻干管开口处在火焰上加热灭菌一下，并且保持下面的菌种菌种活化步骤在火焰旁操作。然后逐渐敲开冻干管，直至适当位置。（敲开位置以可以很好注入无菌水以及吸取混匀后的液体为准）直接敲开法。方法二：首先将冻干粉甩至底部圆球位置，然后用70%的酒精脱脂棉球擦净冻干管，将冻干管的前列（注意不是圆球端）放在火焰稍微加热灭菌。然后直接用大镊子敲打前列，敲开后将破口处在火焰上加热灭菌一下，并且保持下面的菌种菌种活化步骤在火焰旁操作。然后逐渐敲开冻干管，直至适当位置。（敲开位置以可以很好注入无菌水以及吸取混匀后的液体为准）。水环境中的菌株包括肠炎弧菌、河流水体细菌、淡水蓝藻等。红色嗜盐碱古菌菌株

霉菌也是常见的菌株，包括绿霉菌、黄曲霉等。威斯康星米勒菌菌种

埃希菌大小在宽0.4--0.7μm，长约1--3μm。革兰阴性。多数菌株有周身鞭毛，能运动。有菌毛，包括普通菌毛和性菌毛。有些菌株可以有致病性菌毛。肠外传染菌株常含有多糖包膜，即微荚膜。埃希菌兼性厌氧，对营养要求不高。普通琼脂平板培养37℃的环境24小时后，形成直径2-3mm的圆形凸起灰白色S型菌落。在人和动物肠道中繁殖却速度比较慢一些，成倍增长的时间为一天。在肥沃的土壤表层可存活数月。有些菌株在血琼脂平板上呈β溶血。在液体培养基中呈均匀浑浊生长。适合的温度范围是15--45℃。有些菌株对热 的抗性比较强，在60℃仍可存活15分钟。威斯康星米勒菌菌种

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