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金黄色葡萄球菌免疫学检测方法：免疫学检测方法主要是基于免疫学理论研究，其是通过设计的抗原、抗体和免疫细胞，检测抗原和抗体的结合以及免疫细胞分泌的细胞因子的，从而达到检测目的一种实验方法。该技术方法主要包括酶联免疫法、免疫荧光法、免疫胶体金法等。①酶联免疫法：其原理是利用抗体与抗原在载体表面的特异性结合，加入某种酶，酶与抗体或抗原结合在一起，从而形成可以跟踪抗体或抗原的标记物，由于抗原或抗体与受检样品的反应产生抗原或抗体的复合物，此时加入酶反应显色底物，产物的量的大小与检测物质的量的大小呈正相关，分析显色的情况从而确定样品中待检测物的含量。目前已经开发了几种根据ELISA技术用于检测培养上清液和食物样品(例如干酪，土豆沙拉，火腿和牛奶)中的金黄色葡萄球菌。大肠杆菌噬菌体T2 丛枝菌根 白假鬼伞菌布拉酵母 菌 酿酒酵母 马克斯克鲁维酵母 干酪乳杆菌科氏芽孢杆菌.冬虫夏草冬虫夏草菌蝙蝠蛾被毛孢中华被毛孢菌株

关于铜绿假单胞菌的干冰保存法一般为-70摄氏度左右，即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。液氮保存法一般为-196摄氏度，是适用范围较广的铜绿假单胞菌保存法。冷冻干燥保存法的原理是首先将铜绿假单胞菌冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分。从菌体中除去大部分水分后，细胞的生理活动就会停止，因此可以达到长期维持生命状态的目的。绿脓假单胞菌(绿脓杆菌)保存操作流程是，菌株复苏按三区划线法将留菌管内的原始菌株进行复苏，隐球菌除传显色培养基以外，另传1/2块血平皿上述菌株统一37摄氏度孵育48小时。菌种鉴定一般在48h后观察结果。保藏方法是传代培养。栖冷克吕沃尔菌如果是在液体培养基中则呈浑浊状生长，铜绿假单胞菌在液体表面形成菌落。

金黄色葡萄球菌的分布特征及耐药率，为临床合理用药提供依据.方法回顾性分析医院2011年1月1日-12月14日ICU和临床科室金黄色葡萄球菌传染分布及耐药率.结果金黄色葡萄球菌主要来源于痰液标本，ICU与临床科室各占91.73%和70.11%，其他标本类型中ICU以肺泡灌洗液为其次占3.67%，其他临床科室为伤口分泌物占11.49%；金黄色葡萄球菌在ICU对万古霉素，利奈唑胺，呋喃妥因和喹奴普汀/达福普汀敏感率较高为100.00%，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)所占比率为59.63%。

金黄色葡萄球抗药性：在自然状态中金黄色葡萄球菌只对青霉素和四环素两种维生素有抗性，而对红霉素、氯霉素、链霉素则没有抗性，并且金黄色葡萄球菌对青霉素的抗性比四环素的大。金黄色葡萄球菌经亚硝酸钠诱变后，对青霉素、红霉素、氯霉素、链霉素4种维生素的抗性有所增加，而对四环素的抗性有所下降。诱变后金黄色葡萄菌球对大部分维生素的抗性得到了提高，亚硝酸钠诱变对金黄色葡萄球菌的抗药性是有利的。金黄色葡萄球菌(Staphalococcusaureus)属革兰阳性球菌，微球菌科，葡萄球菌属。铜绿假单胞菌中的原内毒养素蛋白质是一种高分子、低毒性，原性强的保护性抗原。

大肠杆菌的培养：将保藏状态的菌种放入适宜的培养基中培养，逐级扩大培养得到纯而壮的培养物，即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物。菌种发酵有一般需要2-3代的复壮过程，因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同，所以要活化，让菌种逐渐适应培养环境。菌种经过冷冻干燥后，生长延迟期较长，需连续两次继代培养才能正常生长。将菌种接种至一新鲜培养基上，每萌发一次即为一代，因此，当原始菌种复溶并转至新培养基内生长，即认为已传代一次，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥的菌种为第0代，冷冻干燥的原始菌种开启后转种为第1代，直到第3代为工作菌种。菌种的传代次数（自原始菌种冻干粉起）不得超过5代。直接从冻存摇的菌甘油放了不少可能会抑制菌的生长，活力差，而且多余的甘油对细菌生长不利，经划板的菌株活力好，可以挑菌摇菌提质粒或者做表达用。德氏保加利亚乳杆菌LBY-27 嗜热链球菌 STY-31 婴儿双歧杆菌35624嗜酸乳杆菌 SDC2012,2013 鼠李糖乳杆菌 LC705.土壤戈登氏菌菌株

铜绿假单胞菌为土壤中存在的较常见的细菌之一。冬虫夏草冬虫夏草菌蝙蝠蛾被毛孢中华被毛孢菌株

大肠杆菌耐药性的产生机制：细菌获得耐药性是因为存在耐药基因、敏感菌一旦通过突变选择或结合，转导或转化就可获得耐药性，而几乎所有的病原菌均可查见耐药质粒、质粒的传递加速了耐药性在各菌株间的传播、大肠杆菌是临诊上由质粒介导耐药性的重要细菌之一。1959年日本Aki-ba等人发现并证实多重耐药性可在大肠杆菌和痢疾杆菌间互相传递、1962年此种传递耐药性的因子被命名为耐药因子或R质粒。1963年Lebek从致病性大肠杆菌中发现了R质粒。1969年，Smith曾亲自服用带有质粒的大肠杆菌，证明R质粒的出现与使用抗s素呈正相关。其后，有很多关于正常人、病人及畜禽R质粒检出情况的报道、现在已知R质粒的宿主普遍，可以在多种菌属中传播，目前已发现携带R质粒的细菌有：葡萄球菌、链球菌、淋球菌、几乎整个肠菌科、假单胞杆菌、流感杆菌等。冬虫夏草冬虫夏草菌蝙蝠蛾被毛孢中华被毛孢菌株

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