金黄色葡萄球菌

大肠杆菌长数微米，呈杆形，至早可能于1、3亿年前与哺乳动物同时出现，并就势大摇大摆地定居于后者的肠道中。所以，当不到20万年前智人开始在地球上行走时，大肠杆菌早已是他们肚子里的老居民了。据估算，现今，我们星球上大肠杆菌总数以数万亿亿计，占全部细菌总数的100亿分之一。它们中的一半与其他细菌杂居共处，舒适地栖居在哺乳动物的大肠里：人类、小牛犊、母牛、猪……还有鸟和一些鱼类及爬行动物，所有的脊椎动物都榜上有名。可是尽管如此，这些生物却毫无怨言，因为大肠杆菌和它的伙伴并不是寄生菌，而是“共生菌”，它们在对我们无害的前提下，从我们的肠道里直接攫取所需物质。枯草芽孢杆菌能够产生类似细胞分裂素、植物生长养素的物质，促进植物的生长使植物抵抗病原菌的侵害。金黄色葡萄球菌

大肠杆菌可以在多种底物上生存，并在厌氧条件下使用混合酸发酵，产生乳酸盐、琥珀酸盐、乙醇、乙酸盐和二氧化碳。由于混合酸发酵中的许多途径产生氢气，因此这些途径要求氢气水平低，例如大肠杆菌与耗氢生物如产甲烷菌或硫酸盐还原菌生活在一起。大肠杆菌在37°C(98、6°F)条件下生长至佳，但一些实验室菌株在49°C(120°F)条件下可以繁殖。大肠杆菌生长在各种确定的实验室培养基中，如LB培养基或任何含有葡萄糖、磷酸一铵、氯化钠、硫酸镁、磷酸氢钾和水的培养基。生长可以通过有氧或无氧呼吸来驱动，使用多种氧化还原对，包括酸、甲酸、氢和氨基酸的氧化，以及底物如氧、硝酸盐、富马酸盐、二甲基亚砜和三甲胺氮氧化物的还原。[21]大肠杆菌被归类为兼性厌氧菌。当氧气存在并可用时，它就使用氧气。然而，它可以通过发酵或厌氧呼吸在无氧条件下继续生长。在无氧条件下继续生长的能力对细菌来说是一个优势，因为在水占主导地位的环境中，细菌的存活率会提高的。竹荪棘托铜绿假单胞菌普遍存在于假单胞菌属的其他细菌以及肺炎杆菌、大肠杆菌、霍乱弧菌等g-细菌中。

保存条件斜面、穿刺菌和冻干粉可常温运输，但应在4-10度长期保存。甘油菌可常温运输，但应在-80度长期保存。微生物菌种应保存于低温、清洁和干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退。

冻干管的开启方法：方法一：将冻干粉甩至底部圆球位置，然后用70%的酒精脱脂棉球擦净冻干管，将冻干管的前列（注意不是圆球端）放在火焰上加热。然后迅速滴几滴无菌水至加热处，此时冻干管的前列会自动破开。然后用镊子轻轻敲下冻干管前列，并将冻干管开口处在火焰上加热灭菌一下，并且保持下面的菌种菌种活化步骤在火焰旁操作。然后逐渐敲开冻干管，直至适当位置。（敲开位置以可以很好注入无菌水以及吸取混匀后的液体为准）直接敲开法。方法二：首先将冻干粉甩至底部圆球位置，然后用70%的酒精脱脂棉球擦净冻干管，将冻干管的前列（注意不是圆球端）放在火焰稍微加热灭菌。然后直接用大镊子敲打前列，敲开后将破口处在火焰上加热灭菌一下，并且保持下面的菌种菌种活化步骤在火焰旁操作。然后逐渐敲开冻干管，直至适当位置。（敲开位置以可以很好注入无菌水以及吸取混匀后的液体为准）。

铜绿假单胞菌的液氮较低温保存法，将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中，密封于安瓿管内，然后控制冷却速度，使安瓿管温度逐步下降至-35摄氏度时，即可置于-150摄氏度～-196摄氏度的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物，都可用此法保存。微生物菌种应保藏于低温、清洁和干燥的地方，室温放置时问过长会导致菌种衰退；菌种操作应在无菌条件下进行，防止杂菌污染，斜面菌种保藏时间通常为1-2个月，应根据菌种状况及时转接；冻干菌种保藏时间通常为5~10年；菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时更换新的菌种。金黄色葡萄球可以直接用于继续传代，用来做上述应用。

铜绿假单胞菌的检测方法成为纤维及其制品检测铜绿假单胞菌的依据。检测铜绿假单胞菌的操作步骤为，制备样液；样液在培养液中，置(35+2)摄氏度增菌培养18h~24h；挑取培养物，于十六烷三甲基溴化铵琼脂平板.上画线接种，置(35土2)摄氏度分离培养18h~24h；取可疑菌落涂片，做革兰氏染色，镜检为革兰氏阴性菌者应进行生化试验。被检样品经增菌、分离培养后，证实为革兰氏阴性杆菌，氧化酶及绿脓菌素试验均为阳性者，即可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。如绿脓菌素试验阴性而明胶液化、硝酸盐还原产气和42摄氏度生长试验三者皆为阳性时，仍可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。枯草芽孢杆菌在发酵过程中能产生多种氨基酸，对作物有生长调节的作用。岛篮状菌菌种

金黄色葡萄球菌代谢类型为需氧或兼性厌氧，对环境要求不高。金黄色葡萄球菌

大肠杆菌表达系统是目前应用很广的蛋白表达系统。它具有：遗传背景清楚。易于培养和控制。转化操作简单。表达水平高。成本低。周期短等特点。同时是常用也是经济实惠的蛋白表达系统，在基因表达技术中发展至早。Escherich于1885年发现大肠杆菌。1976年Struhl、1977年Vapnek及1978年Chang等分别将酵母DN段、粗糙链孢霉DN段和哺乳动物cDN段导入大肠杆菌，引起其表型的改变，证明了外源基因在大肠杆菌中可以使现有功能的活性表达。这些研究为大肠杆菌表达系统的发展奠定了理论基础。1980年，Guarante等在Science杂志上发表了以质粒、乳糖操纵子为基础建立起来的大肠杆菌表达系统。这一发展构成大肠杆菌系统的雏形。金黄色葡萄球菌

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