大肠杆菌耐药性的产生机制:细菌获得耐药性是因为存在耐药基因、敏感菌一旦通过突变选择或结合,转导或转化就可获得耐药性,而几乎所有的病原菌均可查见耐药质粒、质粒的传递加速了耐药性在各菌株间的传播、大肠杆菌是临诊上由质粒介导耐药性的重要细菌之一。1959年日本Aki-ba等人发现并证实多重耐药性可在大肠杆菌和痢疾杆菌间互相传递、1962年此种传递耐药性的因子被命名为耐药因子或R质粒。1963年Lebek从致病性大肠杆菌中发现了R质粒。1969年,Smith曾亲自服用带有质粒的大肠杆菌,证明R质粒的出现与使用抗s素呈正相关。其后,有很多关于正常人、病人及畜禽R质粒检出情况的报道、现在已知R质粒的宿主普遍,可以在多种菌属中传播,目前已发现携带R质粒的细菌有:葡萄球菌、链球菌、淋球菌、几乎整个肠菌科、假单胞杆菌、流感杆菌等。枯草芽孢杆菌普遍分布在土壤及腐烂的有机物中。红拟迷孔菌
利用较低温甘油保存法保存铜绿假单胞菌菌种时,要将保存的铜绿假单胞菌接种于1.7毫升肉汤管中,在37摄氏度恒温培养箱培养18小时后加人无菌甘油0.3毫升,使甘油浓度为15%,充分混匀,吸取1毫升分装于无菌的冷冻管或1.5毫升离心管,封好盖子,在-20摄氏度冰箱中放置3小时后,置-70摄氏度冰箱中长期保存。菌种复苏:从-70摄氏度冰箱中取出一只菌种保存管(已保存2年3个月),迅速用接种环轻轻刮取几下,转种于已预温到37摄氏度的普通琼脂平板上,37摄氏度培养18~24小时。半固体保存法,要用接种针挑取少量菌苔移种于无菌半固体培养管,肉汤中加人琼脂粉至终浓度为0.25%,于37摄氏度培养18小时;用无菌方法将培养管的软木塞换为灭菌的橡胶塞后,放人菌种保存箱4摄氏度保存。红拟迷孔菌金黄色葡萄球是人类的一种重要病原菌。
一些研究已经研究了大肠杆菌的蛋白质组。到2006年,4237个开放阅读框架中的1627个(38%)已经通过实验确定。给出了大肠杆菌K-12的4639221个碱基对序列。在注释的4288个蛋白质编码基因中,38%没有被赋予任何功能。与其他五种已测序的微生物进行比较,发现其基因家族普遍存在,且分布较窄。大肠杆菌内部有许多相似基因的家族也很明显。至大的旁系同源蛋白质家族包含80个ABC转运蛋白。基因组作为一个整体,就局部复制方向而言是惊人地有组织的。鸟嘌呤、寡核苷酸可能与复制和重组有关,而且大多数基因都是定向的。基因组还包含插入序列(IS)元件、噬菌体残余物和许多其他异常组成的斑块,表明基因组通过水平转移具有可塑性。
使铜绿假单胞菌在土壤中繁殖后进行干燥保存的方法是,取适量土壤(5克)置于塞有棉塞的试管中,加水或加入充分稀释的液体培养基(以含水量为土壤较大持水量的60%为宜),然后高压灭菌。再将需保存的铜绿假单胞菌进行大量接种,培养至菌丝能用肉眼确认的程度为止,移入干燥器中经短时间干燥或风干后密封,冷藏或室温保存。硅胶保存法以6~16目的无色硅胶代替砂子,干热灭菌后,加入菌液。加菌液时,由于硅胶的吸附热常使温度升高,因而需设法加以冷却。磁珠保存法将菌液浸入素烧磁珠(或多孔玻璃珠)后再进行干燥保存的一种方法。金黄色葡萄球可以直接用于继续传代,用来做上述应用。
金葡菌是导致医院和社区严重传染的常见病原体之一,能够引起不同程度的疾病,从轻微的皮肤或黏膜传染到甚至危及生命的脓毒血症、败血症或肺炎等。它已成为全球重症监护病房(ICU)、创伤等传染率较高的病原菌,也是常见的耐药菌之一。耐甲氧西林金葡菌(MRSA)的出现对公共卫生安全带来威胁。值得注意的是,此前传染过金葡菌并不足以建立保护性免疫并预防随后的传染,这种情况在复发性皮肤和软组织传染中尤为明显。金葡菌传染后宿主不能建立起保护性免疫,相关机制尚不明确,这导致对其疫苗的研发较缓慢。金黄色葡萄球营养要求不高,在普通培养基上生长良好。Acinetobacter toroneri菌种
怎么判断大肠杆菌的性能,大肠杆菌有时出现污染怎么办?红拟迷孔菌
铜绿假单胞杆菌离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。关于细胞贴壁少的问题,冻存细胞解冻时1毫升细胞液要加10毫升-15m培养液,而培养基越少细胞越容易贴附。复苏细胞分装的问题,试验中复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。红拟迷孔菌
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