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PEI转染试剂基本参数
  • 品牌
  • Polysciences
  • 产地
  • 美国
  • 主要组成成分
  • 聚乙烯亚胺
  • 产品名称
  • PEI转染试剂
  • 贮藏
  • 4度
  • 生产企业
  • Polysciences
  • 规格
  • 1g
  • 厂家
  • Polysciences
  • 有效期
  • 24个月
PEI转染试剂企业商机

稳定转染方法:准备DNA-PEI复合物:DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用1.5-5μL线性PEI转染试剂(这个需要客户自行摸索配比,每一批转染试剂和每一批DNA比例可能会稍有不同)。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管,一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL离心管。3.转染细胞:直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时,去除生长培养基,替换成无血清培养基,然后滴DNA-PEI复合物。转染1.5h后,添加½体积的包含30%血清的生长培养基。4.孵育细胞和分析结果:在CO2培养箱中37℃下孵育细胞至可以分析检测。转染后5h即可检测到转入基因的表达。5.转染24h后,将细胞传代至新鲜的生长培养基中(将细胞稀释10倍以上),在CO2培养箱中37℃孵育过夜。第二天加入与转染抗性基因相匹配的筛选药物。约1~2周可筛选到耐药性克隆,在这期间需经常更换含筛选药物的生长培养基。PEI转染试剂可以转染哪些细胞?即用型PEI转染试剂如何储存

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PEI在于可以应用于体内试验。当初试验经费很有限,被逼无奈只能放弃脂质体2000,选择PEI,以至于相当长的时间内,转染试验都不顺利。下面是几点关于PEI转染的注意要点:1. PEI的使用量可以参照脂质体2000的说明书,所用质粒尽量去内2. 转染时,一定要把PEI+DMEM加入到质粒+DMEM中,顺序不可错,轻微混匀,静止20 min3. 转染后4小时,一定要换液!换含有FBS的完全培养液!因为PEI对细胞毒性太大4. 如果后续试验涉及到稳定筛选,建议把血清浓度适当提高。PS:事实证明,PEI是可行的,已经做出稳定细胞系了。无动物源成分PEI转染试剂中国代理权PEI转染试剂使用的注意事项有哪些?

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稳定转染方法:1.接种细胞:转染前一晚,用胶原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数(不建议用胰酶)。调整细胞浓度,将细胞铺入细胞培养的器皿,每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物:DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用1.5-5μL线性PEI转染试剂(这个需要客户自行摸索配比,每一批转染试剂和每一批DNA比例可能会稍有不同)。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管,一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL离心管。

接种细胞:转染前,用胶原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数(不建议用胰酶)。调整细胞浓度,将细胞铺入细胞培养的器皿,每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物:DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用1.5-5μL线性PEI转染试剂(这个需要客户自行摸索配比,每一批转染试剂和每一批DNA比例可能会稍有不同)。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管,一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL离心管。3.转染细胞:直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时,去除生长培养基,替换成无血清培养基,然后滴DNA-PEI复合物。转染1.5h后,添加½体积的包含30%血清的生长培养基。PEI转染试剂是一种合成的聚乙烯亚胺聚合物。

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对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板,可适当降低铺板密度,以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞,可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情况下,DNA-PEI复合物仍能转染细胞,但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到宜转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。4.对大多数细胞来而言,每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX转染试剂都能获得较高转染效率。使用者也可尝试每1μgDNA使用1.5~4μL体积线性PEIMAX转染试剂进行优化。PEI转染试剂是一种高分子化学类转染试剂。293细胞PEI转染试剂使用说明

PEI转染试剂是线性的好还是分支的好?即用型PEI转染试剂如何储存

我国经济进入“新常态”,总体上推动血小板裂解液,WB自动孵育系统,微流控器官芯片,蓝牙无线标签机从粗放式增长向注重质量、效率方向转变。民间资本的进入也一定程度刺激我国血小板裂解液,WB自动孵育系统,微流控器官芯片,蓝牙无线标签机市场活力。社会对健康类产业的关注度越来越高,迫切需要对血小板裂解液,WB自动孵育系统,微流控器官芯片,蓝牙无线标签机的规模和结构进行核算。监管体系缺失,山东的疫苗事件中,体现出销往24个省市的疫苗各方面监管力度小。制药企业和各大医药机构由不同部门管理,这种分段监管方式存在很大的医药健康漏洞。目前全球销售产业发展主要有美国波士顿—剑桥的医药产业集聚区、德国图特林根的医药产业集聚区、日本富山县的医药产业集聚区、印度班加罗尔的仿制药产业集聚区等九大发展模式。而我国仍以医药服务和医药商品为主,整体收入规模偏小。美国销售产业与中国有所不同,和美国相比,中国的产业仍处于初创期。在经济新常态下,中国大销售产业凭借独特资源和市场优势,一举成为资本角逐的重点领域之一。有关机构预测,中国销售产业规模未来5年年均复合增长率约为27.26%。即用型PEI转染试剂如何储存

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