对铜绿假单胞菌进行保存的较低温甘油保存法与半固体保存法,二者进行比较,较低温甘油保存法具有菌种保存时间长、存活率高和色素保存完好的明显优势;并具有操作简便、污染少、传代频率低、菌株性状典型、占用的空间小等优点,易于在教学和科研中使用。但在采用较低温甘油保存法时,要注意较低温甘油保存法中甘油的浓度为15%,也有采用30%甘油和40%甘油进行保种,不同的甘油。浓度适应的菌种有所侧重。菌种复苏时速度要快,要在解冻前进行移种,移种后仍可将保存管冻于-70摄氏度冰箱中继续保存,若待完全解冻后再移种,菌株有可能无法复苏。铜绿假单胞菌原称绿脓杆菌。神话脂环酸芽孢杆菌菌株
大肠杆菌是一种革兰氏阴性兼性厌氧菌(如果有氧气,可通过有氧呼吸产生ATP,但如果没有氧气,可转换为发酵或厌氧呼吸)和不产孢的细菌。细胞通常是杆状的,约2.0微米长,直径为0.25–1.0微米,细胞体积为0.6–0.7微米3。大肠杆菌染色呈革兰氏阴性是因为它的细胞壁由一层薄薄的肽聚糖层和一层外膜组成。在染色过程中,大肠杆菌被番红颜色,染成粉红色。细胞壁周围的外膜为某些抗s素提供了屏障,这样大肠杆菌就不会被青霉素破坏。有鞭毛的菌株是能动的。鞭毛有毛周排列。它还通过一种被称为紧密粘接素的粘附分子附着并作用于小肠的微绒毛上。紫色链霉菌琥珀变种菌株各种水、空气、正常人的皮肤、呼吸道和肠道等都有铜绿假单胞菌存在。
铜绿假单胞菌所培育的一般工艺流程为菌种接种培养—种子罐培养—发酵罐发酵培养—收集培养液后处理。由于发酵的基质为液态,发酵时菌体、底物及产物可达到一个均质的状态,这对发酵过程中的检测和控制都是十分有利的;随着科研人员对生物反应器的不断改进,发酵过程中的无菌环境得以保证,使得产品质量稳定性很高;此外,液态发酵易扩大生产规模,生产过程中液体输送方便,易于机械化操作,适合工业化生产的发酵工艺。铜绿假单胞菌在土温10-40摄氏度范围内能够正常生长繁殖,在10-24摄氏度生长繁殖较缓慢,并随着温度增高而繁殖加快。
铜绿假单胞菌原称绿脓杆菌。在自然界分布普遍,为土壤中存在的较常见的细菌之一。各种水、空气、正常人的皮肤、呼吸道和肠道等都有铜绿假单胞菌存在。铜绿假单胞菌存在的重要条件是潮湿的环境。铜绿假单胞菌的学名是Pseudomonasaeruginosa,当中的Pseudomonas是由希腊语的pseudo及monas所组成,意即虚假的单元,是早期微生物学用作描述病菌的。而Aeruginosa则是铜绿(即铜与空气中的氧气、二氧化碳和水等物质反应产生的物质,又称铜锈。化学式Cu2(OH)2CO3),正好表达了这种细菌所产生的青色的色素。绿脓素的生物合成是以群体效应来调控,就像充满囊肿性纤维化病人肺部铜绿假单胞菌的生物膜一样。怎么判断大肠杆菌的性能,大肠杆菌有时出现污染怎么办?
金黄色葡萄球菌对高温有一定的耐受能力,在80℃以上的高温环境下30min才可以将其彻底杀死,另外金黄色葡萄球菌可以存活于高盐环境,较高可以耐受15%浓度的NaCl溶液。由于细菌本身结构特点,利用70%的乙醇可以在几分钟之内将其快速杀死。金黄色葡萄球菌代谢类型为需氧或兼性厌氧,对环境要求不高,37℃为较适生长温度,能在各种恶劣环境中存活下来,因此,用一般的营养琼脂即可正常培养细菌。金黄色葡萄球菌是常见的食源性致病菌,普遍存在于自然环境中。金黄色葡萄球菌在适当的条件下,能够产生肠有害元素,引起食物中毒。近几年,金黄色葡萄球菌引发的食物中毒报道层出不穷,由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒占食源性微生物食物中毒事件的25%左右,金黄色葡萄球菌成为只次于沙门氏菌和副溶血杆菌的第三大微生物致病菌。金黄色葡萄球形态为球形,在培养基中菌落特征表现为圆形。暗绛红链霉菌菌种
金黄色葡萄球在血琼脂平板上形成的菌落较大,有的菌株菌落周围形成明显的完全透明溶血环(β溶血)。神话脂环酸芽孢杆菌菌株
铜绿假单胞菌的生长对营养要求不高。对有正常菌群存在的临床标本或采自环境中的标本应接种选择性培养基如麦康凯琼脂培养基(MAC);对无正常菌群存在的临床标本如血液、脑脊液、穿刺液等可接种普通全营养型培养基(如TSA、PCA、营养琼脂}或血琼脂培养基、铜绿假单胞菌培养基。普通琼脂培养基上生长18~24h可以见到扁平、湿润的菌落,该菌所产生的带荧光的水溶性青脓素与绿脓素相结合将使得培养基呈亮绿色;在血琼脂平板上生长时可以见到在菌落的周围有溶血环,菌落呈金属光泽;在铜绿假单胞菌培养基上呈蓝绿色或者红褐色菌落,365nm紫外灯下显荧光。如果是在液体培养基中则呈浑浊状生长,在液体表面形成菌落,而在培养基底部细菌的生长不良。神话脂环酸芽孢杆菌菌株
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