项卡(图8)创建和启动自定义协议。要手动控制流量,使用“手动模式”标签选择所需的井,压力,和温度(如果使用加热歧管)。有关自动化协议或每次融合的手册,请参阅CellASICO《ONIX2微流体系统用户指南》。注意:对于需要快速交换溶液的实验,请执行以下操作可以应用以下技术:高压(55.2kPa[8psi)下的流量对于初始过渡,然后将流量减小到标准压力长期暴露于6.9-13.8kPa(1-2psi)。 软件操作下图显示了使用ellAsICEONX2软件进行实验的两种模式,请参阅CllASICEONIX2MicrofuidieSystem用户有关软件功能的详细信息的指南。图7.手动模式降低了ONIX2系统的迭代操作。可以手动设置操作参数,此模式a5o提供了选项运行简短的自动印版设置序列,这些序列上海益启生物的细胞计数器询价公司电话。长宁区MerckWB实验加速器Merck仪器联系电话
预先装有特定于印版的默认设置。这些设置顺序可以编辑如果需要图8.协议编辑器模式允许创建和编辑实验协议。协议由一系列环境组成控制和/或每个融合步骤。可以根据需要添加和更改步骤。准备好协议后,可以使用“运行”选项卡来执行它。在下面概述的培养方案示例中,通过将压力(27.6kPa[4ps]持续15秒)固定到孔组中,将ells从8孔加载6和8通过以345kPa(5psi)的流速流动4和5孔5分钟,将未捕获的细胞从腔室中冲洗掉。接下来的孔被灌注从孔1提取30分钟的基线洗涤液或生长液。将Cls从孔2暴露于诱导剂1小时,然后将诱导剂用H2O冲洗掉。从1孔中洗涤或生长溶液30分钟。在第3孔中对第二个诱导剂重复上述两个步骤。CAX2-MXT20歧管,使用setpaintof37吧。 规格产品订购信息,续培杨浦区MerckSNAPi.d.2.0加速器Merck仪器咨询问价益启生物公司带您了解细胞分析仪详情。
疫检测对照,茴香霉素处理和PDGF处理的3T3小鼠成纤维细胞裂解液(10-0.63 ug)被转移到Immobilon8-P膜上。印迹被阻止补充有0.5%脱脂奶粉(NFDM)的Tris缓冲盐水含0.1%Tweeno 20表面活性剂(TBST),并用一级抗B-Tubulin进行探测(MAB3408)和次级HRP偶联的山羊蚂蚁(AP1 24P)在上述条件。将印迹暴露于X射线胶片一分钟。维护SNAP i.d.o 2.0系统清理去除协议每次使用时应清洁SNAP i.d.o 2.0系统。清理去除盐碱中的盐或污染物和管道,抽吸真空并通过系统冲洗散去的水。注:请勿对SNAP i.d.9 2.0系统进行高压灭菌。可以拆卸框架,并用中性清洁剂洗涤,然后用蒸馏水彻底冲洗。风干。要拆卸框架,请使用右侧的蓝色夹子调整框架的方
2psi),并需要15秒的时间来灌注电池。加载,然后以27.6kPa(4psi)流动8和6组井停留15秒以捕获细胞。然后在69kPa处流动6组井韦尔斯1-5(1psi)持续30秒以冲洗装载通道这些条件可能需要根据您的细胞类型进行优化所需的捕获密度。6.评估显微镜的负载密度。如果负载不足发生了,rcpeat加载协议7.要清理去除未捕获细胞的腔室,请流过一个或多个入口孔在34.5kPa(5psil的情况下持续5分钟)的解决方案。在手动模式选项卡上:单击“运行自定义序列”按钮或转到ProtocolEditor输入所需的参数。有关创建的更多信息压力[kPa)协议请参阅CellASICONIX2微流体系统程序图6.1-5井的流速指导。8.进入“细胞培养”或“溶液切换”部分。盘子存放存放在室温下。不要存放在上海益启生物细胞分析仪订购方便。
A板。在“手动模式”选项卡上(图7),单击“运行液体灌注”序列按钮。或者,在“协议编辑器”选项卡上(图8)输入所需的步骤和条件。建议的压力1-5组井的流动时间为34.5kPa(5psi)和5分钟,分别。注意:对于倾向于黏附或聚集的细胞,请充分灌注第8组以及第1-5井组将使细胞在细胞中附着于通道的发生率装货有关创建协议的更多信息,请参考CelIASICD图5.CellASICONIX2微流体系统的生产线《ONIX2MicrofluidicSystem用户指南》。使用空气压力实现流量控制,使每一个中的液体都充满单元加载出色地。板上的多个孔被组合在一起,并通过使用CelASICDONIX2微流体系统的压力驱动方法通过油路的单个气动管线每套油井被称为“油井”。groupA真空管线用于将板密封到万用板上海益启生物的细胞跨膜电阻仪询价联系方式。长宁区MerckWB实验加速器Merck仪器联系电话
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关闭真空。同样,溶液将被吸收到印迹架中,并且表面可能看起来干燥。重要提示:孵育10分钟后,再抽真空。11.向下压框架并施加真空。等待5至8秒钟,直到框架完全空了。真空运行连续添加30 mL洗涤缓冲液(对于MultiBlot为15 mL)。重复洗涤步骤3次(共3次)4次洗涤)。12.关闭真空,然后从框架上取下吸墨架。从污点固定器中取出污点,并与适当的检测试剂。如果使用了MultiBlot孔空白,则卸下并清洗。 扩展一级抗体孵育:一小时至过夜1.执行《通用议定书》的步骤1至5。2.加入2.5 mL(对于MultiBlot),5 mL(对于Mini blot)或10 mL(对于Midi blot)1X一抗(浓缩液)通常在标准免疫检测过程中使用)。3.用盖子盖住吸墨纸固定架。如果需要的话,将其从底座长宁区MerckWB实验加速器Merck仪器联系电话