铜绿假单胞菌分解蛋白质能力甚强,而发酵糖类能力较低,分解葡萄糖,伯胶糖,单奶糖,甘露糖产酸不产气,不分解麦芽糖,菊糖和棉籽糖,甘露醇、乳糖及蔗糖,能液化明胶。分解尿素,不形成吲哚,氧化酶试验阳性,可利用枸椽酸盐。不产生H2S,MR试验和VP试验均为阴性。铜绿假单胞菌有菌体o抗原和鞭毛h抗原。一是o抗原含有内毒养素和原内毒养素蛋白质两种成份。原内毒养素蛋白质是一种高分子、低毒性,免疫原性强的保护性抗原,不只存在于不同血清型铜绿假单胞菌中,而且普遍存在于假单胞菌属的其他细菌以及肺炎杆菌、大肠杆菌、霍乱弧菌等g-细菌中,是一种良好的交叉保护抗原。二是脂多糖,与特异性有密切关系。枯草芽孢杆菌易在枯草浸汁中繁殖,故名。棒束青霉
铜绿假单胞杆菌的冻干菌种是经冷冻干燥并抽真空保存的,开启后必须一次使用完,不能留菌粉下次再用;另外安瓿管里大部分仍是用牛奶作为保护剂,里面菌体为少数,复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上,否则可能造成复苏不成功。菌种活化前,如要长期保藏,请将安瓿管保存在4-10摄氏度的环境下。操作前如有不明白之处,应先咨询专业人员,避免不必要的损失。菌种操作应在在无菌条件下进行;转钟完毕,废弃物应经灭菌再做丢弃处理,以免污染周围环境。复苏后,微生物菌种应保藏于建议的温度、清洁和干燥的地方,室温放置时间过长或导致菌种衰退。Paenibacillus stellifer菌株铜绿假单胞菌在血琼脂平板上生长时可以见到在菌落的周围有溶血环,菌落呈金属光泽。
制备大肠杆菌感受态细胞的关键是什么?质粒DNA的质量和浓度:用于转化的质粒DNA应主要是超螺旋态的,转化率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比,但当加入的外源DNA的量过多或体积过大时,则会使转化率下降。一般地,DNA溶液的体积不应超过感受态细胞体积的5%,1ng的cccDNA即可使50ul的感受态细胞达到饱和。对于以质粒为载体的重组分子而言,分子量大的转化效率低,实验证明,大于30kb的重组质粒将很难进行转化。此外,重组DNA分子的构型与转化效率也密切相关,环状重组质粒的转化率较分子量相同的线性重组质粒高10~100倍,因此重组DNA大都构成环状双螺旋分子。
铜绿假单胞菌低温保存法主要为简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4摄氏度冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月。液氮较低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至-35摄氏度时,即可置于-150~-196摄氏度的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法长期保存。铜绿假单胞菌的学名是Pseudomonasaeruginosa。
注意事项:冻干粉菌种为菌种与脱脂奶粉溶液混合后,加入到真空冻干管里,经真空冻干制成。因菌种里面真空并且已经休眠,因此一定要按照本中心提供的说明书步骤进行活化。活化之后的菌种需要再传代2次,活力达到比较好。建议每代菌种都要做成甘油菌进行-80度冻存(厌氧菌需要在液氮条件下储存)。冻干粉菌种可以常温运输,收到后不开管可以在冷藏条件下保存3-15年。如果开管,就要马上全部用完。磁珠菌种为1代菌液与磁珠混合后,菌种充分被磁珠吸附。磁珠菌种含有12颗,可以使用12次。运输时候我们加入冰袋运输,收到后需要**温-80度冻存。甘油菌为做好的菌悬液与50%的甘油等体积混合后做成的形式,里面甘油浓度为20-25%。收到后可直接吸取100-200μL甘油菌接种到液体培养基中扩大培养。可以-80℃保存,保存周期3年。穿刺菌:穿刺菌为用接种针接种好菌种后插入到固体培养基中,经培养后,会在接种针穿刺的地方形成明显的穿刺线,收到该形式菌种后可挑取穿刺线上的菌接种到相应的培养基中,一定温度培养即可。可在4℃保存一个月。定量菌液一般为工作菌种(常规为三代)定量成客户要求的浓度,一般情况下是现配现发货。运输的时候我们会加入冰袋运输,-20度保存12个月。如果是在液体培养基中则呈浑浊状生长,铜绿假单胞菌在液体表面形成菌落。灰带栓菌菌株
枯草芽孢杆菌定殖、繁殖速度更快。棒束青霉
SHBCCD73676乳酸片球菌SHBCCD73676=ATCC8042=CCM2425=DSM20238=JCM20119=NBRC3076=NCTC6990PediococcusacidilacticiAssayofpanthenol,aminoacidanddexpanthenol;测定赖氨酸SHBCCD73677枯草芽孢杆菌SHBCCD73677BacillussubtilisSHBCCD73678嗜热链球菌SHBCCD73678Streptococcusthermophilus酸奶SHBCCD73679解藻酸弧菌SHBCCD73679=ATCC17749VibrioalginolyticusTypestrainSHBCCD73680表皮葡萄球菌SHBCCD73680StaphylococcusepidermidisSHBCCD73681褪色沙雷氏菌(粘质沙雷氏菌)SHBCCD73681Serratiamarcescens限制性内切酶SmaⅠSHBCCD73682谷氨酸棒杆菌SHBCCD73682Corynebacteriumglutamicum赖氨酸;谷氨酸SHBCCD73683动物双歧杆菌动物亚种SHBCCD73683B乳制品发酵,食品饮料SHBCCD73684解糖假苍白杆菌SHBCCD73684PseudochrobactrumsaccharolyticumSHBCCD73685解糖假苍白杆菌SHBCCD73685PseudochrobactrumsaccharolyticumSHBCCD73686淤泥根瘤菌SHBCCD73686RhizobiumborboriSHBCCD73687解糖假苍白杆菌SHBCCD73687PseudochrobactrumsaccharolyticumSHBCCD73688人参田地类诺卡氏菌SHBCCD73688=KCTC19187Nocardioidespanacihumi模式菌株棒束青霉
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