大肠杆菌的耐药可以是天然固有的,也可以通过后天的基因突变、基因转移获得。固有耐药性(intrinsicresistance),即耐药性的产生并不依赖于抑菌药物的存在,而是细菌细胞所固有的,与细菌的遗传和进化密切相关。固有耐药性包括自发基因突变导致的耐药性和细胞膜药物外输作用引起的耐药性。获得性耐药(acquiredresis—tance)是指细菌在抑菌药物选择性压力存在下经过基因突变,或细菌在生长过程中由于移动耐药因子的转移而获得的一种表型。主要包括移动因子和抑菌药压力作用下引起基因突变所导致的耐药性。就目前的研究现状来看,大肠杆菌的耐药性机制主要有5种:①抗s素作用位点的改变或新作用位点的产生。②酶对抗s素的修饰和破坏。③增加抗s素从大肠杆菌向细胞外的主动排出作用。④细菌外膜通透性的改变。⑤质粒介导的耐药性。一种耐药机制可以对多种抗s素表现为抗性,同一种抗s素也常常出现多种耐药性机制共同抑制的现象。铜绿假单胞菌菌体的一端有单鞭毛。琉球曲霉菌株
枯草芽孢杆菌菌剂的生产关键技术在于发酵培养。发酵培养的优化改良涉及提高菌株生长繁殖速度及抗类菌物质的分泌量两个方面,可以通过发酵条件如pH值、温度、通气条件及发酵配方的优化来实现,不同的菌株所需的条件也各异。枯草芽孢杆菌在含大豆水溶物的培养基或土壤中生长良好,且分泌较多的抗类菌物质。菌株操作应在无菌条件下进行,防止杂菌污染。斜面菌苔转接方法,将配套液体培养基倾入斜面试管中并使用无菌接种环将菌苔刮取于液体中,将含有菌苔的液体培养基倒回原始管中,振荡使菌苔分布均匀。将无菌棉拭子充分浸入菌悬液,并涂布平板1/5~1/3区域,使用接种环交叉划线涂布区域使形成单菌落。尼泊尔链游动菌菌株枯草芽孢杆菌具有较强的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶的活性,促进饲料中营养素降解。
金葡菌传染可引起化脓性炎症和有害元素性疾病。1.局部化脓性炎症:金葡菌可以引起疖、痈、蜂窝组织炎、伤口化脓、骨、关节的传染;也可以引起内脏部位传染,如肺炎、脓胸、中耳炎、心包炎、心内膜炎等。社区获得性金葡菌性支气管肺炎常见于老年人。本菌是脑室腹膜分流术后脑膜炎第二位较常见的病原。2.全身传染:如败血症、脓毒血症等。3.食物中毒:进食污染肠有害元素食物后,经30分钟-8小时潜伏期,即可出现恶心、呕吐、腹部疼痛和腹泻等急性胃肠炎症状,发病1-2天可自行恢复,预后良好。4.葡萄球菌烫伤样皮肤综合征(SSSS):传染产生表皮溶解有害元素的金葡菌所致。多见于新生儿和幼儿及免疫功能低下的成人,患者皮肤呈弥漫红斑、起皱、继而形成水疱,至表皮脱落。
大肠杆菌摇瓶发酵常用的化学合成培养基有LB、SOB、SOC等。培养基中通常含有碳(能)源、氮源,以及微营养物如微生物和微量元素,这些营养物的浓度与比例,对实现生产重组微生物的高密度发酵是很重要的。培养基中复合氮源的种类对重组大肠杆菌的高密度发酵也很重要。在某些情况下,向培养基中添加一些营养物质能提高生产率。这些营养物的作用可能是作为产物前体,也有可能是阻止产物的降解。发酵过程:1、种子活化:将保存于-80℃的种子甘油菌室温解冻,取500ul菌接入50mlLB培养基,再加入相对应的筛选抗性,37℃培养7h。2、上罐:将上步活化的种子50ml接入3L发酵培养基中,设定温度,空气流量,压力值,监控DO与PH值。3、从发酵4小时开始,每隔1h进行取样检测OD,当OD值≥40时,开始诱导。4、诱导物:IPTG(1mol/L,过滤除菌),加入4ml,至终浓度达到1mmol/L,诱导阶段温度控制再35℃,其他条件不变,诱导10小时。5、诱导结束,放罐,5000rpm离心,收集菌体,于-80℃冰箱保存。大肠杆菌的流行性是存在一定的区域分布特征的。
大肠埃希氏菌(Escherichiacoli,E、coli),又称大肠杆菌,是肠杆菌科(Enterobacteriaceae)、埃希氏菌属(Escherichia)的表示菌。因Escherich在1885年发现而得名,因其具有结构简单、需要的营养物质简单、易于培养、繁殖速度快、分布广等特点,无论在科学试验研究中,还是在食品安全和相关疾病研究中,常作为载体菌、指示菌、病原菌备受广大科研工作者的关注。如何快速检测样品中的大肠杆菌是研究者几十年来一直亟待解决的问题,特别是大肠杆菌生长过程中的形态、染色特性等基本内容。试验通过革兰氏染色的方法,对培养8~24h大肠杆菌的形态特征进行研究,对今后更好地控制和利用大肠杆菌,具有指导意义和参考价值。处理用枯草芽孢杆菌处理过的土壤对土壤脲酶均表现出刺激效应。橄榄色毛壳
枯草芽孢杆菌能刺激动物(人体)免疫组织的生长发育,激发T、B淋巴细胞。琉球曲霉菌株
大肠杆菌属的系统发育:大量属于该物种的菌株已得到分离和鉴定。除了血清型(videsupra),它们还可以根据它们的系统发育(即推断的进化史)进行分类。如下所示,其中该物种分为六组。特别是全基因组序列的使用产生了高度支持的系统发育。基于这些数据,大肠杆菌的5个亚种被区分开来。系统发育距离(“关联性”)和病理学之间的联系很小,例如O157:H7血清型菌株形成一个分支(“一个独特的群”)—下面的E群——都是肠出血性菌株(EHEC),但并不是所有的EHEC菌株都是密切相关的。事实上,四种不同的志贺氏菌嵌套在大肠杆菌菌株(见上),然而E.albertii和E.fergusonii不属于这个群体。事实上,在包括类型菌株在内的系统基因组研究中,所有志贺菌都被放在大肠杆菌的一个亚种内,因此很难进行相应的重新分类。所有常用的研究菌株大肠杆菌属于a组,主要来源于Clifton的K-12菌株(λ⁺f⁺。O16)并且在较小程度上来自d'Herelle的大肠杆菌菌株(B菌株)(O7)。琉球曲霉菌株
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