金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus,S.aureus)也称“金葡菌”,隶属于葡萄球菌属,是革兰氏阳性菌表示,为一种常见的食源性致病微生物。该菌较适宜生长温度为37℃,pH为7.4,耐高盐,可在盐浓度接近10%的环境中生长。金黄色葡萄球菌常寄生于人和动物的皮肤、鼻腔、咽喉、肠胃、痈、化脓疮口中,空气、污水等环境中也无处不在。金黄色葡萄球菌是常见的食源性致病菌,普遍存在于自然环境中。金黄色葡萄球菌在适当的条件下,能够产生肠有害元素,引起食物中毒。近几年,金黄色葡萄球菌引发的食物中毒报道层出不穷,由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒占食源性微生物食物中毒事件的25%左右,金黄色葡萄球菌成为只次于沙门氏菌和副溶血杆菌的第三大微生物致病菌。枯草芽孢杆菌能够产生类似细胞分裂素、植物生长养素的物质,促进植物的生长使植物抵抗病原菌的侵害。橙色隐孢囊菌
大肠杆菌可以在多种底物上生存,并在厌氧条件下使用混合酸发酵,产生乳酸盐、琥珀酸盐、乙醇、乙酸盐和二氧化碳。由于混合酸发酵中的许多途径产生氢气,因此这些途径要求氢气水平低,例如大肠杆菌与耗氢生物如产甲烷菌或硫酸盐还原菌生活在一起。大肠杆菌在37°C(98、6°F)条件下生长至佳,但一些实验室菌株在49°C(120°F)条件下可以繁殖。大肠杆菌生长在各种确定的实验室培养基中,如LB培养基或任何含有葡萄糖、磷酸一铵、氯化钠、硫酸镁、磷酸氢钾和水的培养基。生长可以通过有氧或无氧呼吸来驱动,使用多种氧化还原对,包括酸、甲酸、氢和氨基酸的氧化,以及底物如氧、硝酸盐、富马酸盐、二甲基亚砜和三甲胺氮氧化物的还原。[21]大肠杆菌被归类为兼性厌氧菌。当氧气存在并可用时,它就使用氧气。然而,它可以通过发酵或厌氧呼吸在无氧条件下继续生长。在无氧条件下继续生长的能力对细菌来说是一个优势,因为在水占主导地位的环境中,细菌的存活率会提高的。简单伽穆孢多数大肠杆菌菌株生长有菌毛。
金黄色葡萄球菌免疫学检测方法:免疫学检测方法主要是基于免疫学理论研究,其是通过设计的抗原、抗体和免疫细胞,检测抗原和抗体的结合以及免疫细胞分泌的细胞因子的,从而达到检测目的一种实验方法。该技术方法主要包括酶联免疫法、免疫荧光法、免疫胶体金法等。①酶联免疫法:其原理是利用抗体与抗原在载体表面的特异性结合,加入某种酶,酶与抗体或抗原结合在一起,从而形成可以跟踪抗体或抗原的标记物,由于抗原或抗体与受检样品的反应产生抗原或抗体的复合物,此时加入酶反应显色底物,产物的量的大小与检测物质的量的大小呈正相关,分析显色的情况从而确定样品中待检测物的含量。目前已经开发了几种根据ELISA技术用于检测培养上清液和食物样品(例如干酪,土豆沙拉,火腿和牛奶)中的金黄色葡萄球菌。
大肠杆菌的培养:将保藏状态的菌种放入适宜的培养基中培养,逐级扩大培养得到纯而壮的培养物,即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物。菌种发酵有一般需要2-3代的复壮过程,因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同,所以要活化,让菌种逐渐适应培养环境。菌种经过冷冻干燥后,生长延迟期较长,需连续两次继代培养才能正常生长。将菌种接种至一新鲜培养基上,每萌发一次即为一代,因此,当原始菌种复溶并转至新培养基内生长,即认为已传代一次,从菌种保藏中心获得的冷冻干燥的菌种为第0代,冷冻干燥的原始菌种开启后转种为第1代,直到第3代为工作菌种。菌种的传代次数(自原始菌种冻干粉起)不得超过5代。直接从冻存摇的菌甘油放了不少可能会抑制菌的生长,活力差,而且多余的甘油对细菌生长不利,经划板的菌株活力好,可以挑菌摇菌提质粒或者做表达用。枯草芽孢杆菌具有更强的营养物质竞争能力以及氧气竞争优势。
枯草芽孢杆菌在土温10-40摄氏度范围内能够正常生长繁殖,在10-24摄氏度生长繁殖较缓慢,并随着温度增高而繁殖加快,25-37摄氏度较适宜生长繁殖,在碳源充足(也就是有机质丰富)时约20--30分钟繁殖一代,超过48摄氏度后生长繁殖受到抑制,但也能繁殖,在60摄氏度条件下可长期存活,在120摄氏度条件下可存活20分钟。水分是枯草芽孢杆菌生长的先决条件,在缺少水分的条件下,枯草芽孢杆菌表现为芽孢状态(休眠),不能生长和繁殖。在土壤湿度低于15%时,枯草芽孢杆菌不能正常生长和繁殖。在土壤湿度15-30%时,枯草芽孢杆菌可生长繁殖,当土壤湿度在30-45%范围内较适宜枯草芽孢杆菌的生长繁殖。实际上,当土壤湿度大于45%时,并不影响枯草芽孢杆菌的生长和繁殖,但是这个湿度条件往往对农作物不利。铜绿假单胞菌在普通培养基上可以生存并能产生水溶性的色素。丝孢酵母属菌种
大肠杆菌的性价比非常高,受到各大生产商的青睐。橙色隐孢囊菌
在枯草芽孢杆菌中,有的菌株是α-淀粉酶和中性蛋白酶的重要生产菌;有的菌株具有强烈降解核苷酸的酶系,故常作选育核苷生产菌的亲株或制取5'-核苷酸酶的菌种。枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质,这些活性物质对致病菌或内源性影响的条件致病菌有明显的抑制作用。枯草芽孢杆菌迅速消耗肠道中的游离氧,造成肠道低氧,促进有益厌氧菌生长,间接抑制其它致病菌生长。刺激动物(人体)免疫组织的生长发育,激发T、B淋巴细胞,提高免疫球蛋白和抗体水平,增强细胞免疫和体液免疫功能,提高群体免疫的能力。橙色隐孢囊菌
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