酸解提取鼠尾Ⅰ型胶原及相对分子质量和浓度检测鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下,其腱性组织被水解成胶冻状溶液,从而分解成鼠尾Ⅰ型胶原蛋白分子。抽取鼠尾Ⅰ型胶原150 μL滴在薄膜上,可形成液滴状胶原蛋白凝胶( ,其生物力学强度极差,一碰即散。将鼠尾胶原蛋白进行SDS-PAGE,结果显示:Ⅰ型胶原蛋白原液在相对分子质量130 000附近有明显条带,另一条带的相对分子质量大于170 000(图 2) 。胶原蛋白浓度为1.8 mg/mL。吸取矿化液倒入小培养皿中,将鼠尾Ⅰ型胶原纤维浸泡在矿化液中。矿化2、6 d后,分别将矿化后的Ⅰ型胶原纤维进行TEM和电子衍射观察。建立利用自制的鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法。深圳正规鼠尾胶原哪家便宜

鼠尾胶原是一种天然培养基,它具有促进体外培养细胞(特别是上皮细胞)贴壁的作用,同时它也是一种天然的黏附剂,当我们需要在培养瓶或培养皿内放置小玻片,制备细胞爬 片时,可在瓶底涂一层胶原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培养瓶之中。通 过本实验可掌握鼠尾胶原的制备方法,以及如何切割小玻片,并利用鼠尾胶原将其固定于 培养瓶内。 实验设备及材料: 大鼠尾巴、剪刀、镊子、止血钳、弯头吸管、平皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、天平、生理 盐水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、盖玻片、培养瓶、钻石笔、鼠尾胶原。 实验内容: 1、制备鼠尾胶原。 2、切割小玻片。 3、利用鼠尾胶原将小玻片固定于培养瓶内。长沙正规鼠尾胶原价格开盖在超净台上过夜晾干,也可以在室温放置1小时后。

简介:鼠尾I型胶原蛋白(Collagenfromrattail,TypeI)系采用Birkedal-Hansen方法在无菌下制备,纯度达到95%以上,可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于细胞培养皿的包被,特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养;也可用于制备三维胶原凝胶,使细胞在模拟的三维环境中生长。质量标准:1、SDS-PAGE分析纯度大于95%。2、无菌检验结果为阴性。3、本品2μg/cm2包被细胞培养皿后培养PC-12细胞,贴壁及生长正常。4、本品浓度1mg/mL,pH7.0时形成具有一定强度的三维胶原凝胶,NIH-3T3细胞在三维凝胶内生长正常、PC-12细胞在三维凝胶表面生长正常。
鼠尾胶原制备详细步骤: 1、取大鼠尾巴洗净,75%酒精浸泡 5 分钟; 2.将尾巴剪开、去掉皮毛,并剪成小段,抽出银色的尾键 3、将尾腱剪断置于平皿中,PBS 浸泡; 4、将所有的尾键放于 Tris-HCl 中,4 度过夜。 0.05mol/L Tris-bas 的 Tris-HCl 的配制方法。 称量 6gTris 置于 1L 烧杯中,加入约 800ml 去离子水,充分搅拌溶解,浓盐酸调节 PH,高压灭菌。 5、吸去 Tris-HCl,将尾腱称重(0.5-1 克); 6、将尾腱置于平皿内剪碎,转移至三角烧瓶中; 7、按每克尾腱 50ml 的比例,加入 0.1%醋酸溶液; 8、摇晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置一星期; 9、离心,4 度 4000 转/分,30 分钟; 10、吸取上清,过 300 目滤器。 11、每 600ml 上述粗提液中加入 100ml 0.14 mol/LNaOH,8000 转 5min 离心,弃上清,留絮状沉淀。 12、将絮状沉淀物置于三蒸水中,用 0.1mol/L(1000:6)醋酸溶解沉淀物。胶原蛋白是脊椎动物和无脊椎动物支持结构的主要组成。

胶原蛋白的应用:1.胶原天然的紧密的纤维结构,使胶原材料显示出很强的韧性和强度,适用于薄膜材料的制备;2.大较胶原被用作制造肠衣等可食用包装材料.其独特之处是:在热处理过程中.随着水分和油脂的蒸发和熔化.胶原几乎与肉食的收缩率一致。而其他的可食用包装材料还没被发现具有这品质;3.由于胶原分子链上含有大量的亲水基团. 所以与水结合的能力很强. 这一性质使胶原在食品中可以用作填充剂和凝胶;4.胶原在酸性和碱性介质中膨胀,这一性质也应用于制备胶原基材料的处理工艺中。使胶原纤维在电子显微镜下形成间距为680埃的明暗相间的特征性的横纹结构。珠海正规鼠尾胶原价格
整个操作请于冰上进行,因室温下鼠尾胶原I可迅速成胶。深圳正规鼠尾胶原哪家便宜
鼠尾胶原是一种天然培养基和一种天然的黏附剂,可用于细胞培养皿的包被,特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养;也可用于制备三维胶原凝胶,使细胞在模拟的三维环境中生长。制备鼠尾胶原方法:1、取大鼠尾巴洗净,75%酒精浸泡5分钟;2、手持尾巴,用止血钳夹住鼠尾的较高,折断尾骨后拉出尾腱;3、将尾腱剪断置于平皿中,生理盐水浸泡;4、重复步骤2、3,直至尾腱量够用;5、吸去生理盐水,将尾腱称重(0.5-1克);6、将尾腱置于平皿内剪碎,转移至三角烧瓶中;7、按每克尾腱50ml的比例,加入0.1%醋酸溶液;8、摇晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置一星期;9、离心,4000转/分,10-15分钟;10、吸取上清,分装成小瓶,4℃保存。深圳正规鼠尾胶原哪家便宜
鼠尾胶原蛋白I型,用那一种胶原酶可以溶解:1.将胶原加入到0.1M的醋酸中,制备成浓度为0.1%的溶液。在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。2.建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底铺上一层氯仿。氯仿的量约为胶原溶液的10%。不要晃动或搅拌。在2-8度中放置过夜。在无菌条件下转移上层的胶原溶液。我们不建议用过滤的方法无菌化。已经发现该方法会导致丢失蛋白。3.稀释一定数量的胶原溶液。4.按照6-10ug/cm2的浓度包被培养瓶。在室温或37度结合数小时或者2-8度过夜。5.从包被表面除去多余的液体。过夜干燥。如果胶原溶液不是无菌的,这时候可以在无菌细胞操作室中暴光在紫外线下过夜消毒。在接...