HE染色病理技术中**常用的一种方法,通过它可以做出病理诊断和发现寻求别的辅助方法,以达到准确,完整的病理诊断。一、染色目的 病理学的所有切片,都必须通过一种以上的染料,通过各种不同的方法,将切片中各种不同的物质,在不同染液的作用下,将其显示出来,使之在光学显微镜下,能够完全的观看各种结构。例如,HE染色,好质量的切片可以清晰地显示出多不同的结构,细胞核着蓝黑色,细胞浆着粉红色,软骨着蓝色等。清晰的结构为诊断提供的依据,因此,染色技术也是病理技术中的重要组成部分,必须不断地总结,方能提高。HE染色规范化流程以及注意事项。江西值得信赖的HE染色分析

HE 染色是病理的主要常規染色,其命名是因為主要使用的兩種試劑分別為Hematoxylin與Eosin Y,藉由電荷與吸附性的差異,組織結構對不同染料的結合程度不同,我們可以發現Hematoxylin呈色在細胞核,Eosin Y則表現在細胞質與間質,染色優良的片子可以幫助我們在顯微鏡下看到清晰的細胞型態與變化。染色步驟依試劑提供者的建議而有所差異,而且每個實驗室需要的顏色深淺不一,使用者可以依自己的需求另行調整,以下是力沛有限公司建議的HE染色步驟上海病理HE染色外包让您放心的实验外包公司,专业HE染色实验服务平台。

HE染色常见问题:Q5:细胞核呈棕红色改变答:苏木素染液过度氧化;或苏木素染色后反蓝不足导致。应该立即更换苏木素染色液。或在流动自来水(一般自来水PH7.5-7.8),或在稀释的氨水溶液,或在0.2%碳酸氢钠中适当浸泡,这些步骤均可一定程度地加强苏木素染色后的反蓝效果。Q6:伊红染色较淡答:伊红的PH改变了(PH可能已大于5);或反蓝液体未漂洗干净,残留后影响胞浆嗜酸性染色;或者切片太薄并且在随后的脱水步骤停留过久。对策:检查伊红染色液PH,可采用乙酸调至4.6-5.0。根据以上提示,调整实验步骤。
HE染色等常规染色,组化或是荧光优先推荐做石蜡切片。原因:石蜡切片对组织的形态保存比冰冻切片好,并且对抗原基本无影响。脂质染色(油红O染**odipy染色,尼罗红染色)必须做冰冻切片,不能做石蜡切片。以下染色必须要新鲜或冷冻组织冰冻切片:ROS染**-半乳糖甘酶染色,ATP染色,胆固醇染色。如果标本已经放在-80°冰箱冷冻了之后又想要做石蜡切片,将标本取出来千万不要解冻直接放于固定液内固定(在固定液内边解冻边固定)。组织形态结构保存完好顺序:新鲜组织立即投入固定液内固定石蜡切片>组织-80°冷冻后投入固定液内固定石蜡切片>新鲜组织立即投入固定液内固定冰冻切片>组织-80°冷冻后直接冰冻切片。HE染色小贴士以及相关技巧分析。

HE染色多聚甲醛保存组织的注意事项:多聚甲醛放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸,使溶液pH降低,从而影响染色。不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。多聚甲醛虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过24小时。多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中,固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留,因此后续实验结果如果受醛基影响,须尽量洗去残留的多聚甲醛。醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,4%多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。冰冻组织切片的HE染色。安徽HE染色服务
科研常备实验操作之HE染色。江西值得信赖的HE染色分析
HE染色样本组织固定与切片:首先将组织样本进行常规的石蜡包埋。在模具中加入液态石蜡,将待包埋的组织样本放入石蜡中,确保组织位置规整。补充少许液态的石蜡后,进行降温冷冻,使石蜡变为固态达到组织固定的效果,然后使用石蜡切片机进行切片,厚度在4-8um左右。将切完后的组织切片放入载玻片上使用40℃温水浸泡使组织充分伸展。组织样本脱蜡:将待测组织样本切片放于二甲苯中,充分浸泡10min,浸泡完后更换二甲苯继续浸泡10min,目的是使用二甲苯将切片中的石蜡溶解,这样可以在进行染液染色的时候,染液可以充分进入组织种,同时,二甲苯还可以起到透明的作用,使切片更容易观察。江西值得信赖的HE染色分析
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