杭州鼠尾胶原价格

鼠尾胶原蛋白：胶原蛋白（Collagen）是结缔组织和内脏部位外基质的主要成分，但在皮肤、肌腱、骨骼中分布较为普遍。胶原蛋白在结构和遗传学上被分为不同类型，I型胶原蛋白（Collagen, Type I）结构上是由2个α1链和1个α2链组成的异源多聚体，在37℃中性条件下可形成3股螺旋结构，被普遍用于多种细胞的培养基质，如肝细胞、纤维细胞、脊髓神经节、雪旺氏细胞等。另外，I型胶原蛋白在细胞生长、分化、迁移和组织形态的发生等方面也具有重要应用。胶原蛋白I（rat tail tendon collagen type I）根据Birkedal-Hansen方法，经过醋酸（HAc）抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备所得，可用于制备三维胶，模拟细胞真实的生长环境；也可以用于包被组织培养皿表面，提高细胞表面粘附性，比如培养角质形成细胞、肝细胞等原代细胞。胶原的立体结构与一般的球状蛋白质完全不同。杭州鼠尾胶原价格

鼠尾Ⅰ型胶原：材料与方法：1. 主要材料、试剂和仪器鼠尾、盐酸、等渗氯化钠溶液、钙液、磷液均购自上海晶纯生化科技股份有限公司。日立高新TEM HT770(日本日立公司)；多功能粉末X射线衍射仪。2.酸解提取鼠尾Ⅰ型胶原蛋白取大鼠尾巴洗净，用75%的乙醇浸泡5 min。将尾巴剪开，去掉皮毛，并剪成小段，抽出银色的肌腱。将肌键剪断置于平皿中，用无菌等渗氯化钠溶液浸泡。吸去等渗氯化钠溶液，将肌键置于平皿中剪碎，按每克肌键50 mL的比例加入0.1%的醋酸溶液。摇晃，将肌键分散于醋酸溶液中，4 ℃放置一周，然后以2186×g离心20 min。在醋酸溶液的酸解下，肌腱水解成胶冻状凝胶，置于冰箱4 ℃保存。宁波鼠尾胶原I型胶原蛋白分布非常普遍，是主纤维束的主要成分。

胶原蛋白的提取方法：1.碱法提取：碱法提取胶原蛋白常用的处理剂为石灰、氢氧化钠、碳酸钠等。如Holzer等[5]采用1 %～1.5 %石灰水浸泡的方法提取胶原蛋白。由于它容易造成肽键水解，因此得到的水解产物分子量比较低。所以，若想保留胶原的三股螺旋结构，此法不可取。2.盐法提取：盐法提取胶原蛋白所用的中性盐有盐酸-三羟甲基胺基甲烷(Tris-HCl)、氯化钠、柠檬酸盐等。在中性条件下，当盐的浓度达到一定量时，胶原溶解。并且可采用不同浓度的氯化钠对提取的胶原蛋白进行盐析处理，可以沉淀出不同类型的胶原蛋白。

胶原蛋白是脊椎动物和无脊椎动物支持结构的主要组成。在人的身体中这是皮肤、筋、软骨、骨骼及结缔组织的较主要的蛋白质。胶原蛋白占人体蛋白质总量的三分之一， 不论来源于哪一种动物或哪一种组织的胶原都有许多共同特性。氨基酸组成中约有三分之一为甘氨酸，有脯氨酸和羟脯氨酸。根据其遗传分子结构遗传基因的差别，胶原蛋白分为20 几个亚型。但较为常见的为Ι、Π、ΙΙΙ型胶原蛋白，即间质胶原蛋白。其中I型较为丰富且品质优良。制作鼠尾胶原,并观察利用自制的鼠尾胶原所培养出大鼠耳蜗边缘细胞的效果。

鼠尾Ⅰ型胶原：选择适当的骨修复材料是治好骨缺损的中心环节。目前，临床上常用的有人工骨移植、自体骨移植和同种异体骨移植。其中，人工骨材料多为磷酸三钙、半水硫酸钙等含有钙和磷的无机矿物材料[1-2]，由于不含自体骨组织中的有机大分子Ⅰ型胶原蛋白，其临床疗效远远低于自体骨组织。但是，自体骨移植和同种异体骨移植均来源于人类自身骨组织，数量有限，难以满足临床需要。因此，研发与人类自体骨组织化学成分和分子结构相近的仿生骨材料，成为全世界骨组织工程学者孜孜以求的目标。由于天然骨组织是Ⅰ型胶原蛋白和羟基磷灰石钙生物矿化的产物，在分子结构上，羟基磷灰石钙晶体是以Ⅰ型胶原纤维为模板，呈片状镶嵌在胶原纤维分子间隙，沿着胶原纤维的长轴纵向矿化生长。本研究仿生天然骨组织的分子结构，酸解提取鼠尾肌腱的Ⅰ型胶原蛋白，重构形成Ⅰ型胶原纤维，然后将Ⅰ型胶原纤维放置在矿化液中模拟人体内骨生物矿化，通过透射电子显微镜(TEM)和电子衍射观察羟基磷灰石钙晶体在胶原纤维内部的骨生物矿化。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁，涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录，并且制作简便，成本低廉。制备鼠尾胶原：将尾腱剪断置于平皿中，生理盐水浸泡。徐州鼠尾胶原产品介绍

鼠尾胶原醋酸溶解：稀释一定数量的胶原溶液。杭州鼠尾胶原价格

鼠尾胶原蛋白提取、分离、纯化方法的建立及鉴定：通过对鼠尾进行剥离获得鼠尾腱,用Tris-HCl缓冲液、胃蛋白酶处理获得鼠尾胶原蛋白原液、反复使用氯化钠溶液进行分级盐析、醋酸溶液复溶进行鼠尾胶原蛋白的纯化.超纯水透析除去无机盐类获得纯化的鼠尾胶原蛋白。通过SDS-PAGE蛋白质电泳、氨基酸含量分析等技术手段鉴定.结果 本研究建立的方法可以获得高纯度的鼠尾胶原蛋白,纯度达到电泳纯.与国外进口的商业化鼠尾胶原蛋白产品相比无差异。研究了提取、分离、纯化参数对得率、纯度的影响,建立了较优的鼠尾胶原蛋白提取条件，胃蛋白酶用量:1∶500,酶解时间:72 h,盐析浓度:2 mol/L,提取所用酸溶液:0.05 mol/L醋酸溶液.结论 为鼠尾胶原蛋白的扩大化生产提供了合适的工艺参数,为大量获得鼠尾胶原蛋白并进行更深层次的功效方面研究提供了理论支持和实践基础。杭州鼠尾胶原价格

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