市场上使用的病毒保存液主要有两种,一种是以运送培养基为基础改良的病毒维持液,另一种则为核酸提取裂解液改良的保存液。
前者的主要成分是Eagle's基础培养液(MEM)或Hank's平衡盐,添加了病毒生存所需的盐类、氨基酸、维生素、葡萄糖以及蛋白质,这种保存液使用酚红钠盐做为指示剂,溶液pH值在6.6-8.0时溶液呈粉红色。保存液中添加了必须的葡萄糖、L-谷氨酰胺和蛋白质,蛋白质的提供形式有胎牛血清或牛血清白蛋白,可以稳定病毒的蛋白质外壳。由于保存液营养成分丰富,有利于病毒的成活但是也有利于细菌的生长,如果保存液中污染了细菌,则会大量繁殖,其代谢产物中的二氧化碳会使保存液pH值下降,从粉红色变为黄色。因而大多数厂家都在配方中添加了抑菌剂成分,推荐使用的抑菌剂为青霉素、链霉素、庆大霉素及多粘菌素B等,不推荐使用叠氮钠、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(MCI)和
5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(CMCI)等抑制剂,因为这些组分对PCR反应有影响。由于这种保存液提供的样本基本是活病毒,可以很大程度保持样本的原始性,后续不仅可以用于病毒的核酸提取检测,还能用于病毒的培养和分离。但是用于检测时应该注意的是必须灭活以后再进行核酸提取纯化。
病毒核酸检测过程中,病毒保存液的作用尤其重要,我们的检验工作不可能在采集到样本后就立马进行检测。河北病毒保存管病毒保存液供应商
目前市面上的一次性使用病毒采样管通常分为两种,一种是非灭活的,能够保护病毒的蛋白和核酸的,另一种是灭活型的,通常含有灭活病毒的裂解盐,裂解蛋白而保护核酸。下面我们一起来聊聊这两种病毒采样管都有什么不一样的地方?
非灭活型病毒采样管保存的病毒完整性更好,检出率会更高,除了核酸检测外还可以用于其他研究。灭活型病毒保存液则使用上更安全,操作环境要求也不用那么严格,各有各的优势。
非灭活病毒采样管可以低温非冻型保存,也不会破坏病毒的外壳,方便长途运输;也适用于各种拭子采样样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽拭子等;可以用于H1N1流感病毒和其他任何可以用于拭子采样的病毒,非灭活保存液中的能够有效地防止细菌和,保存液中添加了牛血清白蛋白,能够保护病毒样本,提离率。
河北灭活病毒保存液费用是多少)采集病毒标本时应由专业人员严格按照采样程序进行,标本进行检测时,应在符合安全级别的实验室进行操作。
病毒采样管-适用于、流感病毒、禽流感(如H7N9)、手足口病毒、麻疹等病毒标本以及支原体、脲原体、衣原体标本的采集及运送。病毒及相关样本的冷藏状态下(2-8℃)的48小时内保存与运输。病毒及相关样本的-80℃环境或液氮环境中的长时间保存。
病毒采样管搜集病毒的采样方法
1、先用压舌板压住舌头,然后将采样拭子头部伸入咽喉部位擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,轻度用力拭抹咽后壁部位,应避免触及舌部。
2、以拭子测量鼻尖到耳垂的距离并用手指做标记,将采样拭子以垂直鼻子(面部)方向插入鼻腔,拭子伸入距离少应达耳垂部位到鼻尖长度的一半,使拭子在鼻内停留15-30秒,轻轻旋转3-5次,抽出拭子。
非灭活型病毒保存液的原理:
它同时保留了病毒的蛋白质外壳以及病毒核酸DNA或者RNA,这样就可以保证病毒样本核酸在送检过程中的完整性,虽然操作失误时会也有一定的性风险,但是这种保存液很大程度地保持了病毒样本的原始性,是一种培养型的病毒运输介质,需要注意的是采样后长时间保存需要保持严格低温保存。
不管我们使用哪种病毒保存液来做核酸检测,其主要目的就是在保障相关检测人员安全的情况下,快速有效的检测出是否病毒。以便于我们能更快的找出病毒的藏匿之地。 病毒和细菌受理化因素作用后失去性,称为灭活(inactivation)。
保存液存放一段时间后,容易坏掉。清亮的保存液变浑、长霉、长菌,晚节不保,令人唏嘘。长出菌的还算好,知道不能用。那些已经污染却还将长未长的,躲在哪个盒子里边,用在哪个患者身上,对结果产生*影响,就天知地知了。防止污染,无疑是生产、品控过程的不小挑战。当然,也并不难处理,洁净车间、添加等举措,都能够从容应对。
因为病毒保存液是液态的,在运输过程中有些保存液遇到野蛮装卸或者受航空运输的负压影响,就容易发生渗漏,这样整盒整箱都得报废。如果包装不到位发生渗漏,这样就会很麻烦,所以在包装材质的遴选、结构的设计、制造工艺等这些方面一定要把好关。 添加常温稳定的类,可解决采样后的霉菌污染问题,实现采样液的常温保存。四川灭活型病毒保存液****
病毒采样管是一种通用的采样产品,可以快速灭活病毒可以保证检测人员的风险还避免了气溶胶的风险。河北病毒保存管病毒保存液供应商
病毒保存液(灭活型)采用高浓度的胍盐可以快速对呼吸道病原体进行灭活、保存,,使样品失去性,里面含有的Tris、裂解盐、EDTA等主要目的是裂解核酸而释放出核酸,从而通过后续的实时荧光RT-PCR进行核酸检测,以此判断样本是否含有病毒特征核酸,即是否病毒。操作简单无需配液,体系内含有高效病毒裂解液,采样后即刻灭活病毒,有效防止二次风险。 产品采样前可常温保存12个月,采样后样本可常温保存一周,密闭性好,方便保存运输,节省运输成本。内含核酸Rnase酶抑制剂,更大化程度保护病毒核酸稳定不被降解,大幅提高核酸提取效率。
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